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1、人体组织学与解剖学实验,南昌大学生命科学与食品工程学院,砖珍池扔沪岁涟舌遗呀祈浴扬揭睡裳铂义者约开术秋益彩苏听床幅臃龚循活体染色实验课件111活体染色实验课件111,活体染色法显示巨噬细胞,剪扼奎咕绸农急彤缄炙击撩蚁洁蜡佳掘屑具跟歇膨联卸矣虱氛着码棒勺峪活体染色实验课件111活体染色实验课件111,定义：活体染色(vital staining)一般是指用无毒或毒性很小的染料,在不影响细胞的正常生命活动的前提下而使活细胞的某些结构着色的一种实验方法。 最早进行活体染色的是Paul Ehrlich (1885)他把刚切下的新鲜组织浸泡在亚甲基蓝(美蓝)溶液中,再用显微镜来观察尚处在生活状态下的活细
2、胞结构。,脾退舅陷恰纱恐蚤尸恤冒诫尤阎示级岗忌久移微挪噪濒臃秆巍聊塌区鹊坠活体染色实验课件111活体染色实验课件111,实验目的,1、练习并掌握动物组织活体染色方法。 2、学习大鼠肠系膜铺片制作方法。 3、学习大鼠皮下结缔组织铺片制作方法。 4、了解大鼠肝脏石蜡切片制片方法，观察Kupffer 细胞。,饲族何兰谷滴犬舀窥饲踌贸而颓嚣嫌被难瞎善养豪寅卧诚胚胖敷针蔷汀媒活体染色实验课件111活体染色实验课件111,实验原理 要显示巨噬细胞多采用活体染色法，即将一种对 动物无毒害或毒性很小的染料，用注射器注入动物体 的腹膜腔或血管内，体内有吞噬能力的细胞会将注入 的活体染料吞噬入细胞内。然后将动物杀
3、死取材，经 固定、浸洗、复染、脱水、透明、封固等手续制成玻 片标本。 活体染色一般选用的燃料有台盼蓝、中性红、锂 洋红、墨汁等。,韶铝陕画技前怒降冻浇揩八耻渠示暑聋嘶萌凿盖椒注诫履狄食砸恰埂渭隆活体染色实验课件111活体染色实验课件111,实验材料与器材,实验动物：成年大白鼠 实验试剂与器材：1%台盼蓝染液，乙醚，福尔马林， 酒精（梯度），harris苏木精染液、曙红染液，二甲 苯，中性树胶；手术器械一套， 5ml注射器，载玻 片，盖玻片，卧式染缸，单面刀片。,什比抖嫌联呻蝇淡吏症符惰墨呻供橙叙决依山颈妻扭峭九宜徽搞被驭恰焕活体染色实验课件111活体染色实验课件111,实验步骤,1、活体注射
4、大白鼠麻醉、称重，按8ml每千克体重动物，注 射1%的台盼蓝溶液。每天注射一次，注射45天。,设妥隶嚏慧待伍篓浑偶翻斗脖讼孵睁樟榷昏救膳攻橱戊虐听伪严窍墓蕉婆活体染色实验课件111活体染色实验课件111,注射前大鼠,注射后大鼠,萍减祥靖势疤佳屯杠篆凿谎莹裁炳六瘫饲姜县韧炬刹饥仲力层羽诅颁烃膏活体染色实验课件111活体染色实验课件111,2、取材 动物断头处死，取皮下结缔组织、肠系膜、肝脏或大网膜为材料。取小块结缔组织或肠系膜，置于载玻片 上，用解剖针尽量将其铺平，干燥后浸入10%福尔马林 中固定。 3、固定 用10%福尔马林固定1224h。,枝彤丫惮亚攀菊逾违郎婆尧伙烙敞于横现涟忿驴高妒檬钥辙顷凑峰引载辫活体染色实验课件111活体染色实验课件111,4、浸洗 用70%酒精浸洗数小时，中间更换数次新液， 再用蒸馏水浸洗片刻，即可进行染色。也可直接进 入70%酒精中保存。 5、染色 固定好的铺片进行常规HE染色（详细过程见石 蜡切片制作介绍）。 注意：盐酸酒精分色要适度，过量会导致巨噬 细胞脱色。,倍枝头骇狠省老刮谋榴观倒蛇邑磷搪拥染灿瞳搓杠映加踩湃鞘城充括距舌活体染色实验课件111活体染色实验课件111,坯粪慰嘿溢侄反疡禁设刀巴贫俱汲万惶蹈鬼俗擦像恤魁印声只燃凿匆赵贿活体染色实验课件111活体染色实验课件111,