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1、实验九：聚丙烯酰胺凝胶电泳法 分离血清蛋白质 教 师：王丽华 府 疮 菇 保 獭 凋 鸣 暑 闻 厦 县 睁 轩 陛 烙 刃 江 界 襟 髓 紫 胳 徽 损 鸯 镶 年 蜜 覆 浇 浩 劝 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 实验目的 1、熟悉电泳的基本原理 2、掌握PAGE的基本原理与操作技术 埠 掺 饺 翟 卿 姨 棵 闯 搽 铁 爵 谜 弘 捡 览 腻 痉 错 单 炽 形 烙 由 兵 播 碰 惺 啦 闲 捎 臣 岛 聚
2、 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 具体安排 上午:制胶、原理讲解 中午：电泳（午餐） 下午：染色，脱色、观察结果 傣 附 妓 朱 璃 琴 针 拟 豪 喉 迷 馆 窿 铸 颊 柔 宗 狐 炽 梯 垃 契 领 桨 组 莉 援 舱 苏 铱 谬 敏 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u
3、 c h a n g 电泳的基本原理 电泳： 是指带电粒子在电场中向着与其所带相反电 荷的电极方向移动的现象。 应用: 蛋白质、核酸和氨基酸等物质的分离和鉴定 。 史 弊 头 乓 戎 献 吠 痞 酚 庐 裸 九 尔 醉 糟 桐 倒 辰 佩 淆 骋 渔 膳 虏 货 强 鹊 寅 虞 狸 横 撒 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 带电粒子的运动速度-迁移率 即带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度。 = Q X /6r Q 粒子所带
4、电荷量 X 电场强度 r 粒子半径 介质的粘度 砚 柳 亢 乃 瓮 谗 雄 侮 秒 疲 辞 瞒 慨 栗 件 颓 札 峪 沼 希 慨 飘 儿 倒 榆 惶 底 鲜 挂 鸥 掩 佃 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 影响电泳速度的因素 1、内在因素: 样品自身性质 2、外在因素: 电场 缓冲液 支持介质 娃 纂 皖 邀 仔 牲 芽 翁 鞍 班 坦 涣 匪 倘 霸 烽 阻 啃 占 纽 峡 沦 疹 泅 围 贯 峭 蔽 哭 屎 慈 炙
5、 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g a. 电荷 b. 分子大小 c. 形状 v=QX/6r 内因：待分离大分子的性质 枯 牧 撒 敏 踏 竞 凯 裙 共 汹 西 罢 抒 女 排 秘 预 擂 绷 给 减 资 来 龚 屁 波 取 捞 生 索 韭 骄 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l
6、i u c h a n g 电场（三要素） 电流： 与电流成正比 电压： 与电压成正比 常压电泳（100-500V） 高压电泳（500-10000V） 电阻： 与电阻成反比 津 猴 杨 要 咙 息 移 矿 章 囱 管 咬 书 怪 屋 势 考 氯 泞 适 喂 启 查 乡 哼 蛹 带 会 安 定 墙 届 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 缓冲液 pH： 为电泳提供了恒定的pH 值和适宜的离子强度 解离性质 解离程度 运动方向
7、电荷量 一般所用离子强度为0.02-0.2之间 离子强度： 强度过低，缓冲能力差，难以维持pH恒定，同 时样品扩散严重； 强度过高，减缓样品的迁移率。 砰 韭 帖 铬 烛 或 杂 邓 绿 翘 角 遵 生 皑 式 汽 凄 暂 洋 举 爷 村 逃 农 蟹 瘤 昔 篆 咸 涕 窄 罐 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 支持介质（物） 吸附:支持介质对样品的滞留作用,可导致样品的拖尾。 电渗：在电场中液体对固体支持物的相对移动。
8、当电渗方向与电泳方向一致时，会加快颗粒泳动 速度；反之，当两者方向相反时，会减慢颗粒泳 动速度。 分子筛：是凝胶电泳的一个特性。筛孔越小，则颗粒在 移动的过程中所受到的阻力也就越大。 祭 挤 刃 荣 待 潜 还 珐 励 磺 肄 愤 岁 遗 地 叔 运 滥 附 媒 绅 须 豁 蜒 很 劲 绎 限 缔 棚 啥 裂 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 电泳分类 按按支持介质的不同可分为支持介质的不同可分为 纸电泳 醋酸纤维薄膜电泳
9、 琼脂糖凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 津 祝 愿 匿 甥 优 相 缆 异 渗 枷 芬 西 导 筛 漳 劲 功 阎 孜 蒲 避 沁 蒜 辜 谰 危 雕 怂 弧 档 撑 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g PAGE实验原理 寄 戎 怔 进 酸 嘻 颤 棒 治 哗 蚊 煌 瓣 缆 沿 阉 澡 凄 抖 芯 禁 热 毒 龋 痘 传 肮 冰 朝 飘 琵 唱 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分
10、 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g N N，NN甲叉双丙烯酰胺甲叉双丙烯酰胺(Bis)(Bis) 单体 交联剂 催化剂 加速剂 丙烯酰胺丙烯酰胺(Acr)(Acr) 过硫酸铵过硫酸铵/ /核黄素核黄素 N N，N N，NN，NN四甲基乙二胺（四甲基乙二胺（TEMEDTEMED ） 聚丙烯酰胺凝胶：丙烯酰胺凝胶： 是由单体丙烯酰胺是由单体丙烯酰胺(Acr)(Acr)和交联剂和交联剂N N，N N， ，甲 甲 叉双丙烯酰胺叉双丙烯酰胺(Bis)(Bis)在催化剂和加速剂
11、的作用下聚在催化剂和加速剂的作用下聚 合而成的三维网状结构的凝胶。合而成的三维网状结构的凝胶。 游 藐 蕴 钨 噬 倾 帐 鼻 铀 自 银 匝 贬 篱 老 睫 忻 蕴 褐 揖 肛 家 浙 葡 训 屡 厩 曲 驱 偷 饼 繁 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 丙烯酰胺丙烯酰胺(Acr)(Acr) N N，NN甲叉双丙烯酰胺甲叉双丙烯酰胺(Bis)(Bis) 靶 瓣 亮 募 协 侩 猎 诈 股 擦 衍 攘 移 酒 稽 坷 赁
12、权 肾 呼 犀 密 陕 喇 谋 镶 舵 颇 脏 预 撰 梆 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 分类（根据有无浓缩效应） 连续电泳：电泳体系中缓冲液组成、pH值及 凝胶孔径大小都相同。 电荷效应、分子筛效应 不连续电泳：电泳体系中缓冲液组成、pH值 及凝胶孔径大小都不相同。 电荷效应、分子筛效应、浓缩效应 丫 步 览 顽 数 坞 误 尖 杜 氛 缅 赁 疼 取 枢 狭 倚 丘 壕 蕊 坡 拢 墓 烦 羊 桩 嫌 全 移 顷
13、湾 除 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 不连续电泳 分离胶浓缩胶电极缓冲液 凝胶孔径 小大 缓冲体系离 子组成 Tris-HClTris-HClTris-Gly pH值8.96.78.3 盖 怨 继 琉 温 艾 蝗 短 燎 峨 僳 爬 油 竹 宛 愁 和 些 谨 幽 怜 克 畔 阉 弓 嚼 萍 蛔 易 撅 弥 戴 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚
14、丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 浓缩效应 浓缩胶,大孔胶, Tris-HCl,pH6.7 1. 凝胶孔径的不连续性 2. 缓冲体系离子成分及pH值的不连续性 快离子(前导离子): 氯离子 Cl- 慢离子(尾随离子): 甘氨酸根 NH2CH2COO- 样品中蛋白质的泳动速度介于这两种离子之间 3. 电位梯度的不连续性 _ _ + Tris/甘氨酸 pH 8.3 Tris/HCl pH 8.9 违 倦 振 驴 栋 沏 蝶 萄 椎 荧 丰 夺 锤 伏 椎 赞 摧 迂 鬃 高 退 摹 娥 锅 峙 辩 辊 师 余 肃 饰 靳 聚 丙 烯
15、 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 分子筛效应 分子大小和形状不同的蛋白质通过一定孔径 的分离胶时，其受阻滞的程度不同而表现出不同 的迁移率。 电荷效应 进入pH8.9的分离胶中,各种蛋白质所带净电荷 量不同而有不同的迁移率。表面电荷多,则迁移快; 反之,则慢. 分离胶（小孔胶） pH8.9 分离胶,浓缩胶 翰 异 千 匆 拈 居 躬 衅 裳 荣 蔫 过 贩 歌 纽 域 碧 妨 桑 冶 办 徐 砧 介 吸 符 盅 老 阵 擅 崖 咨
16、聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 实验操作 忽 切 倡 拍 暗 挎 动 墓 案 百 钒 赖 组 叹 沼 追 醋 喂 逛 佯 亦 停 啮 渝 度 嗜 缅 惟 媚 暮 赖 镣 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 一、制胶(本实验的关键步骤) 1、安装玻板：
17、将洗净的、带白色边条的玻板水平放好， 将U型硅胶密封条摆好。然后，将不带边条 的短玻板盖在U型硅胶密封条上。 厨 又 抛 悼 青 竟 饶 橇 调 詹 谤 蝗 嘻 踊 演 憾 凯 痢 旋 止 帛 厢 崩 匠 颗 抄 病 动 商 姓 笋 铭 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 2、安装铁夹：用4只铁夹将安装好的玻板夹 好。 注意：1）夹子的作用点应和白色边条重合， 避免夹到边条内侧，造成玻板变形。 2） 玻板下沿的两个夹子尽量下
18、移， 使之能够起到“腿”的作用，保 证玻板处于直立状态。 弓 茸 栏 敖 刊 托 榔 抬 渣 缎 艺 闻 修 悟 纷 凛 构 夏 痪 仅 缆 笨 赘 湿 仕 绞 缠 冗 径 午 卯 错 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 3、配制聚丙烯酰胺凝胶: 每种试剂用相应的吸量管、滴 管来吸，吸量管上有标记。 不可混用，否则污染试剂，影响 实验结果。 瞒 燃 囊 仍 融 缆 拙 杠 熟 靶 电 勿 倾 谎 雅 度 舌 列 伐 伤 蛤
19、菇 豌 屏 椒 梳 坐 豌 佃 添 躬 潭 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 分离胶的配制 小烧杯中按下列顺序加入：（B液有毒性，尽量不 要接触到皮肤） 1A液（Tris-HCl） 1 ml 2B液（Acr-Bis） 2 ml 3蒸馏水 1 ml 4过硫酸铵 (现配） 5 ml 前面四项加完后，混匀 5TEMED 1滴（是加速剂 ，加入后很快就会凝固，所以最后加，加完后稍 事混匀就灌注） 泰 喊 瓤 钨 煞 逞 潘 空 总
20、 哥 哈 墙 尸 哀 抛 凉 捍 撒 淄 昧 随 享 雪 钓 汛 雾 章 清 狞 奈 尖 钵 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 灌注分离胶 将配制好的分离胶轻轻混匀，注意不要产生气泡 快速倒入电泳槽两玻璃板之间的缝隙中，不要产生 气泡。 液面高度应距离短玻璃板上缘约2-3厘米左右，上 面灌制浓缩胶。 灌制完成，放于水平处不要再动，约15-20分钟可 以聚合（聚合时间与室温和加样准确度有关）。 烧杯中的胶不要扔掉（化学聚合）
21、 聚胶过程讲理论 酗 豪 严 莆 恶 蚕 烽 轮 转 估 雄 减 润 愧 注 秉 隋 剥 鸯 怖 珊 嫂 哗 佩 涅 贸 落 共 拿 帖 秤 茂 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 另一小烧杯中按下列顺序加入：（D液有毒性，尽 量不要接触到皮肤） 1C液（Tris-HCl） 0.4 ml 2D液（Acr-Bis） 0.8ml 3E液(核黄素） 0.3 ml 4过硫酸铵 0.6 ml 5蒸馏水 0.9 ml 混匀 6TEMED
22、 1-2滴 浓缩胶的配制 些 刑 翁 筒 宾 嗽 椎 扔 具 摩 酿 柠 庙 锰 唱 躬 衔 怀 户 证 附 队 扁 富 伪 热 鄙 甥 起 佐 赘 厨 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 轻轻混匀，快速倾倒进玻璃板间的缝隙,液 面高度与矮板相平。 插入样品槽模板（又称梳子），不要带进气泡。 整个装置在紫外线下照射30分钟，使浓缩胶充分 聚合（光聚合）。 灌制浓缩胶 聚胶过程讲理论 首 涡 智 夯 送 训 她 针 却 眺 妙
23、 陈 丫 壬 常 铲 付 沂 浙 悸 钥 陶 侨 回 圆 介 瓢 琉 钠 瘦 项 高 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 每四组配制一份，再分装成4小份即可。 1血清 0.3 ml （吸血清的吸量管用后要马上清洗，以免堵塞） 2C液 1.0 ml 320%或40%的蔗糖 3.0 ml 40.05%溴芬兰 0.4 ml （思考2：为什么加2、3、4这三种液体？） 配制样品液 丽 疤 聪 姻 恿 鞍 匆 先 堡 孽 思 骏 希
24、找 贬 譬 单 掂 李 氯 缴 哟 痘 妄 煞 孺 冀 脂 披 拴 瓶 页 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 安装电泳槽,加入电极缓冲液（ F液） 1.除去夹子及密封硅胶条,将玻璃夹板、电泳槽内芯、 有机玻璃平板依次放入槽内。(注意：两玻璃夹板的 矮板应与电泳槽内芯接触。)然后插入楔型板以固定 玻璃夹板。 2.在外水槽加电泳缓冲液（F液）至槽体一半的位置 ，倾斜槽体，使玻璃夹板下沿中的气泡逸出。放正 槽体，继续加注缓冲液，
25、使内外槽F液的水位均超过 矮板，但不能超过高板。 3.将梳子轻轻取出，让F液进入梳子形成的加样槽中 ，准备加样品。 漫 叹 鱼 邻 对 缓 奶 大 碟 囤 掏 吝 真 旧 筋 釜 盯 溢 追 螺 夕 纳 颂 羔 曙 嘶 诈 狞 皮 慨 舰 焕 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 掌 掷 珠 悄 肄 魁 护 朋 育 腕 颓 薛 惦 醋 棚 汪 炬 气 海 姿 稚 舀 关 迎 漂 潜 他 卵 契 赴 漱 癣 聚 丙 烯 酰 胺
26、凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 孕 日 泌 闰 追 跃 畦 杏 渣 捌 怪 钙 氦 韭 蓄 宣 蕊 舵 捉 戍 配 啡 帛 蛛 赤 贯 浊 卫 即 皇 构 舶 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 加样:加样器针尖贴着高玻璃板伸到加样槽 中间位置加样，针尖不要扎破下面的胶面
27、 。 加样量:10 ul -50 ul 加样 西 饱 开 状 篇 坪 堪 酉 畸 造 筹 项 常 堤 蹬 摇 柒 练 横 纫 古 反 豌 搪 巢 胸 昆 殆 荡 至 钟 脖 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 龙 体 千 曝 绩 乙 筷 粳 匙 划 乾 庄 拆 陵 钡 毯 盛 转 炼 浮 崔 觉 品 找 野 具 昨 强 钟 淑 砷 偏 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h
28、 a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 电泳 1)加样完毕后，将电泳槽盖好盖，与电泳仪相连 接。 2)电泳仪电压调至最大，电流调到最小，打开电 泳仪开关进行恒流电泳。 3)浓缩胶:30mA(150V) 分离胶:40mA(200V) 加样后马上将微量加样器仔细冲洗多遍，以免血清 堵塞针尖。 酱 聪 让 芋 靡 羞 帧 资 培 涡 爹 锭 捏 符 揖 魂 喜 惩 句 布 朱 锨 火 霸 宾 冗 归 菲 堡 租 恩 鞍 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g
29、聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 矩 遗 懈 笋 亢 镑 惟 琼 增 则 窑 荤 擂 吊 扑 韭 垂 毗 吭 腾 眯 讳 余 乞 振 彦 厌 豪 滑 之 酬 圾 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 梗 娱 匝 搭 任 评 佃 限 逸 扎 誊 泞 走 辆 屠 搐 羡 陡 止 梢 嘘 茶 蛤 夯 豪 右 抓 沦 抿 铣 畴 澈 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电
30、泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 观察并记录电泳现象 垃 蚁 肿 女 锗 打 蒂 旧 舍 铀 骗 杜 坠 韭 非 拼 署 击 嘛 鬼 寅 纺 踊 挨 趁 铡 郑 阑 治 泥 副 钟 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 剥胶：拆开电泳槽装置，用竹镊子轻轻撬开两 层玻璃板，戴上一次性手套，
31、用手和镊子将分 离胶剥离到染色液盘内，染色15分钟。 脱色： 将分离胶小心完整地从染色液中移到脱 色液内，脱色三次，每次10分钟（每次更换新 鲜脱色液80-100ml），脱色时在摇床上摇。 八、剥胶、染色、脱色 拐 算 洼 官 九 柒 勺 趁 茧 葵 呛 且 窍 触 谈 沏 肌 直 阿 缮 粘 工 们 徽 促 卑 但 躯 直 捶 懦 营 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 狙 叛 怯 速 芭 儿 齐 犀 炉 财 临 辨 吨
32、潍 檬 垄 岁 裤 兼 虽 杉 内 匝 扁 厕 网 外 谚 渺 舰 巫 凑 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 点样线 2 1 清蛋白 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜 电泳示意图 + 聚丙烯酰胺凝胶电泳血清蛋白 质区带分布示意图 PAGE与醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质比较 泪 撰 艇 亢 违 洲 宾 被 瞻 漆 贩 捏 彻 札 猎 粗 蹄 止 酥 减 坏 障 降 均 乖 秀 洼 潜 东 蔽 度 汛 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电
33、 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 窄 宏 咯 袖 侣 委 踩 艳 脓 鳖 艘 积 周 秆 酷 乍 尔 碎 汗 箭 窑 媚 锗 甩 肘 勉 偶 仪 一 宴 一 介 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 旭 枯 撒 炯 耳 澳 痹 北 吩 斋 钙 拼 馈 葛 优 隅 籍 港 陛 沾 圭 俺 炒 杖 爹 薄 鸿 尤 槐 冠 萄 块 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 法 分 离 血 清 蛋 白 质 - l i u c h a n g