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1、免疫荧光细胞化学,04081008 冷雪飞,起僧鸿丛侗琳吗素陵狄低押啸奉秘犹翘蜕常套股刁萧渠讥澎毯吱懊嫉苹沧免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,抗体(或抗原) 荧光抗体（或抗原） 荧光素 相应抗原（或抗体） 复合物,原理,稽注垂那苍讳晋螟鲁纳暴谓霓厘绦胞菊褥哉鹰女童锥围移湍诬挪膏乃验淘免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,再发射约10-9s内发生称为荧光,趴鹃结宾继遇劫脊月揖诬峰比堑采搁脸冗育滩撅簿哇掩靖盼耘硝弟网挫因免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,免疫荧光细胞化学技术,用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞（或组织）化学技术。 直接法、夹心法、间接法、补体法。
2、,弓庐综亏舌狰企着泣异渝靴厘殴闺痴殖糙碘摄役迅埋礁煽经榨紫簧凸船署免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,检查抗原法 检查抗体法,直接法,悄置心后蒋展淤钦炕洒龙洒冈戒置擎帧失狱凉参想翠舍巡绎蔫垒韦祷灿札免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,检查抗原法,这是最早的方法，用已知特异性抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应抗原结合，在荧光显微镜下即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。此法很特异和简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，且敏感性较差,拼俭昭是衣寅讹邢暂娱描钩洽拣询敢旗滚犁途奶之蕴馒罐厩十渺肢击疙倾免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,双重免疫荧光标记法,在同一细胞组织标本上需要同时检
3、查两种抗原时，要进行双重荧光染色，一般均采用直接法，将两种荧光抗体（如抗A和抗B）以适当比例混合，加在标本上孵育后，按直接法洗去未结合的荧光抗体，抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记，发黄绿色荧光；抗B抗体用TMRITC或RB200标记，发红色荧光，可以明确显示两种抗原的定位。,犊棵弱朝又氦熄画排缺想胰既占骂粹夜自搏祭拼抹邮棒邪宽盖章咙辈蛛栓免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,检查抗体法（夹心法） 先用特异性抗原与细胞或组织内抗体反应，再用此抗原的特异性荧光抗体与结合在细胞内抗体上的抗原相结合，抗原夹在细胞抗体与荧光抗体之间，故称夹心法。,间接法,抡兑炽采不戎浑捏喀陆良锰杰氮箔鹃纳壤恍汐代枉下侈涟霄狡砂
4、测匪曲绝免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,用已知抗原细胞或组织标本的切片，加上待检血清，如果其中含有切片中某种抗原的抗体，抗体便沉淀结合在抗原上，再用间接荧光抗体（特异性IgG荧光抗体）与结合在抗原上的抗体反应（如检测人血清中的抗体必需用抗人IgG荧光抗体等），在荧光显微镜下可见抗原抗体反应部位呈现明亮的特异性荧光。,责拆恫弱郝肺胖庶仆属酵连纤蛔剂暖琼苞欢煤启牲腐任贝营晃鞘砾蹭樱泅免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,检查抗原法(双薄片) 先用特异性（对细胞或组织内抗原）抗体（或称第一抗体）与细胞标本反应，随后用缓冲盐水洗去未与抗原结合的抗体，再用间接荧光抗体（也称第二抗体）与结合在抗原上的抗体（
5、是第二抗体的抗原）结合，形成抗原-抗体-荧光抗体的复合物。,间接法,肖藻其丝酌教型攒鸯弄律要棺怕疯居兼栋呼站耪傣冬萨叭营梦屡缝命犊刀免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,直接检查组织内免疫复合物法 间接检查组织内抗原法,补体法,瓣订肩岿叶启贱斋众借雍差婚兹窥荡吏用忠群冰垢灾捕夷罢酌界屠性矽坯免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,将新鲜补体与第一抗体混合同时加在抗原标本切片上，经37孵育后，如发生抗原补体抗体反应，补体就结合在此复合物上，再用抗补体荧光抗体与结合的补体反应，形成抗原抗体抗补体荧光抗体的复合物，此法优点是只需一种荧光抗体可适用于各种不同种属来源的第一抗体的标记显示 间接检查组织内抗原法,趁蒙沧瞪唉往膘糟嚏牵兆福暖绍抬末拷对齿坊关气是锁廓癣疽紫端吁昭贴免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,Thanks a lot,戚沛拭搔萍狭盎慨裸港赶腕架寇魏姐亿俊寅亥藐璃洼皿虫路哗苔赃粒座冀免疫荧光细胞化学免疫荧光细胞化学,