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1、桩 鉴 酉 弦 质 贩 厘 醒 题 玲 扛 幂 吞 颤 袖 摔 藻 因 术 贝 宫 乱 损 幻 瓶 挥 溶 揍 枢 溉 李 谈 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 食品安全检测技术食品安全检测技术 棋 淖 缠 绸 服 峰 兼 癌 尹 和 疑 引 恒 梧 欧 藉 糟 斗 沼 醇 弗 圃 从 烹 皿 帘 泉 尸 乙 悸 肚 见 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 内容目录 n n 第一节第一节 概述概述 n n 第二节第二节 理化仪器检测技术理化仪器检测技术 n n 第三节第三节 现代生物学检测技术现代生物学检测技术 释 胸 氰 犊 尹 喉
2、医 义 洱 愤 挟 错 保 厩 圭 淀 唾 虞 铁 镐 太 驾 佯 褐 手 繁 高 堆 尽 胖 跨 超 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 n食品安全的检测对象： 农药、兽药、有害重金属、生物毒素、食品 添加剂、致病菌等 n食品安全检测技术分类： 理化仪器分析技术，现代生物学检测技术 定性、定量、在线监测 第一节 概述 咽 彻 蓝 按 贤 这 淹 殖 坞 芜 弃 千 撩 汇 儡 键 俺 衅 牺 瞪 讫 跨 掏 唆 绷 匈 浊 企 尧 笑 战 袭 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 第二节 理化仪器检测技术 样品采集 提取净化 索氏提取、液
3、液、固液、 微波、超声、柱层析等 仪器分析 根据目标物的性质 选择不同方法 仪器方法的检测流 程 尔 溯 手 灵 煽 粗 起 近 似 失 唁 自 渗 喷 订 酶 犯 氰 膝 雇 预 粥 烬 舰 蜀 吭 射 忌 转 版 搬 钦 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 仪器检测技术 痕量无机物定量 无机元素形态分析 气相色谱或液相色谱 电感耦合等离子体质谱联用 电感耦合等离子体质谱(ICP-MS） 原子发射光谱（AES） 原子吸收光谱（AAS） 毛细管电泳质谱（CE-MS） 气相色谱串联质谱 (GC-MS/MS) 色谱质谱联用 高效液相色谱串联质谱（LC-MS/MS） 高效
4、液相色谱质谱（LC-MS） 气相色谱质谱 （GC-MS） 色谱 液相色谱 气相色谱 嘶 淫 篆 娩 化 歪 揉 铃 展 呐 莲 较 桶 桩 清 拽 潞 粗 啮 茵 宪 揪 沿 缀 辖 何 嫩 现 漳 凤 道 嫡 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 俄国植物学家Tswett于 1901年发现：利用吸附 原理分离植物色素。 1906年Tswett创立“chromatography”“色谱法”新名词； 1907年在德国生物会议上第一次向世界公开展示显现彩色 环带的柱管； 1930年R.Kuhn用色谱柱分离出胡萝卜素。 色谱分析法的历史色谱分析法的历史 萎 洁 寅 杨 识
5、赂 销 煮 枫 牢 廉 篮 铜 羹 僳 锨 赖 我 馁 内 猛 优 锋 浙 炭 逛 婪 眼 挺 斟 务 丹 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 1935年AdamsandHolmes发明了苯酚-甲醛型离子交换树脂， 进一步发明了离子色谱 1938年Izmailov发明薄层色谱 1941年Martin 载气: 高纯氦气, 流量1 ml/min; 柱温: 70, 保持2 min,以25/min升至 150,再以3/min升至200,再以8/min升至260,保持10 min; 进样口温度: 250;进样方式:不分流进样, 1.15 min后打开分流阀 和隔垫吹扫。 n
6、质谱条件 离子源(EI)温度: 230,电子轰击能量70 ev,GC - MS接口 温度: 280。 气相色谱与质谱的联用-分析实例 嫁 哟 悠 蕾 台 猿 节 颈 愧 潞 丛 猛 鸿 疯 晤 富 佬 咎 沫 咀 故 匡 井 墒 祸 爪 听 龟 度 汁 高 氧 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 n分析特征量 42中农药的线性范围:0.0011.0g/mL 样品的加标回收率：89%-94%, RSD 10% 方法的最低检出限：0.0010.005 mg/kg ( S/N = 3) n 检测农药种类 有机磷、拟除虫菊酯、有机氯、氨基甲酸酯和除草 剂 n 检测的样品种类
7、 肉类，蛋类，乳品，蔬菜和水果 气相色谱与质谱的联用-分析实例 掇 箍 乞 袱 苦 软 停 拾 枫 净 孪 骑 迷 犬 蹋 怂 庙 蛋 巨 枉 扯 筹 包 痒 蹋 适 竹 翅 撑 癣 功 济 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 2.3高效液相色谱 n高效液相色谱法是继气相色谱之后，70年代 初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱 技术。 n高效液相色谱仪由 高压输液系统、进样系 统、分离系统、检测系统、记录系统 等五大 部分组成。 铜 邹 占 涎 卡 镐 钡 楷 简 衙 研 长 美 倦 粱 蚌 狱 烤 囤 有 帧 旧 活 咽 谣 赛 侩 朔 柄 岗 政 倡 食 品
8、 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 褪 序 两 罕 枣 诫 骸 裴 莎 隋 藏 诺 菌 糊 你 泣 寿 硬 彩 赦 嗜 霄 怯 睦 色 颐 时 杯 再 奈 焙 食 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 液相色谱在食品安全中的应用 n食品添加剂及农药残留的检测（苏丹I号、拟除 虫菊酯等） n食品中兽药残留的检测（瘦肉精、磺胺类药物等 ） n食品加工过程中的毒素残留（黄曲霉素等） 堵 缔 德 沙 狞 草 熊 娠 馒 酒 页 嘉 奇 凰 寨 势 拓 投 礼 富 罗 意 雌 胶 总 鲍 曰 近 草 撑 吵 郝 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安
9、全 检 测 技 术 第三节第三节 现代生物学检测技术现代生物学检测技术 nPCR技术 n酶联免疫技术（ELISA） n基因芯片技术 n生物传感器技术 僧 翁 叙 座 淌 蜡 惰 纸 浆 重 人 顽 阶 摩 祁 闪 嚼 蒙 谱 演 糖 忘 嗡 烦 幸 晨 耗 恫 竣 吹 进 留 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 3.1PCR技术 引物引物 引物引物 3 3 5 5 5 5 5 5 基因组基因组 虞 巷 滚 屎 婶 贬 遁 椽 存 民 旬 迫 嘿 花 抖 咀 认 帚 卷 该 广 里 衷 裳 捡 拔 俘 叉 趁 戚 蓉 辞 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全
10、 检 测 技 术 3 3 3 变性、退火 延伸 变性、退火、延伸 3 PCR 原理 乃 侈 饲 途 奴 拳 体 落 珠 暇 隔 扣 炼 叁 拐 娃 取 夹 曼 氧 淬 炸 绝 懊 语 署 嘘 奋 菜 杆 翔 颤 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 PCR技术在食品安全中的应用 n食品中有害微生物的检测（沙门菌、大肠杆 菌O157、金黄色葡萄球菌等） n转基因食品 RiboPrinter 全自动微生物鉴定系统 BAX系统统目前可检测检测： 沙门氏菌， 大肠杆菌O157:H7, 单增李斯特菌， 李斯特菌， 板歧肠杆菌 可鉴定到菌株。开放式的数据库（菌库）内有5700多种
11、基因指 纹模式，归属180余属，1200余种。包括腐败菌、病原菌、有益 菌及环境微生物。另外，用户可自建菌库。 菌 你 傈 骸 阵 感 站 盒 腹 城 吁 杨 朽 立 湍 戳 牲 糖 澜 主 沁 曾 轻 绥 搞 挂 兽 程 淬 渔 欧 涸 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 3.2ELISA原理 n它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底 物产生颜色反应，用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原 。 n测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性 ，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物 仍保留其原免疫活性
12、与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体） 反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈 颜色。 效 许 河 丸 豢 哟 涕 尊 烤 氦 途 阐 方 庇 纶 缄 醉 垛 赡 展 侠 柄 您 蜜 倍 癣 伺 迪 嘴 甥 拇 坚 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 ELISA的种类和变化 （一）双抗体夹心法 （二）间接法 （三）竞争法 （四）双位点一步法 （五）捕获法测IgM抗体 （六）应用亲和素和生物素的ELISA 务 饮 丘 傣 急 械 遵 弓 走 肖 地 塔 庸 烩 赖 柯 烂 朵 墟 堵 壤 赶 洋 么 妈 晤 赖 辣 扼 忱 徘 茅 食 品
13、 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 双抗体夹心法 瓮 雄 鸵 挤 潘 岭 境 盯 烯 馆 轮 粘 正 霹 暑 谐 熏 搪 柴 馒 卵 畸 羡 悬 抬 攀 恶 纱 刨 疏 琢 卿 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 间接法是检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶 标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故 称为间接法。 煞 指 庙 征 删 幅 稽 览 分 关 荒 炳 醚 型 封 炸 罩 荚 收 悯 弟 旭 殊 哉 防 侨 怠 凉 耕 吸 资 网 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 此法可用于抗原和半抗原的定量测定，也可
14、用于测定抗体 。 精 颁 沈 售 忱 螺 瓢 疥 歉 获 匆 狰 郸 解 弦 赞 泽 谜 顺 钥 墅 届 烹 胎 升 挎 夫 叙 定 秦 披 颜 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 ELISA在食品安全中的应用 食品中农药、兽药的测定 食品中毒素的测定（主要包括黄曲霉毒素， 简曲霉毒素 ） 食品中有害微生物的快速筛检 （如沙门氏 菌 ） 岭 歪 碎 撑 晋 钒 樊 坷 净 察 蛋 陇 曹 口 瓤 镶 措 剧 雹 抉 育 糠 宿 盛 烁 垢 预 拦 戒 去 课 稀 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 3.3基因芯片技术 断 迸 宪 涣 源
15、园 味 救 帜 月 从 熄 揩 览 谰 虑 概 膊 然 恭 拄 结 蹈 锚 境 场 迫 攒 他 斑 耕 遮 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 Different DNA probes (各种 DNA 探针 ) Clinical DNA Samples (临床样本) Microarray (微阵列过程) Hybridization (杂交过程) Scanning (扫描过程) Glass slide (玻片) Image analysis (芯片图象分析) 基因芯片的制造与检测技术 Luminescence or electrochemical detection
16、臀 帜 侗 嗅 叼 康 釜 窄 染 执 雇 殃 檬 棉 褐 摇 珍 州 猾 詹 颗 义 贬 霖 棒 蝉 租 竞 杀 愉 税 林 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 Gene Expression (1)Identificationofallcommonvariants (2)Simultaneousmonitoringoftheexpressionofallgenes (3)Generictoolsformanipulatingcellcircuitry (4)Re-sequencingofmegabaseregions (5)Monitoringthelevels
17、andmodificationstateofallproteins (6)Systematiccataloguesofproteininteractions (7)Identificationofallbasicproteinshapes SYT13 酌 何 导 严 倦 叙 全 碗 棒 赡 您 暗 踞 矮 付 枚 纸 洼 砾 龄 舱 懦 匝 室 联 天 钮 菠 睛 堤 讳 划 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 Mutation detection SNP: Single Nucleotide Polymorphysm -gtacatcaggatcgatacgtag
18、ctagctagctaaaatcgatcatccacatccgtac -cgtagctaactagctaaaatcgatcatccaca- -cgtagctagctagctagaatcgatcatccaca- -cgtagctagctagctaaaatcgattatccaca- cgtagctagctagctaa labeling hybridization cgtagctaactagctaa Wild: Mutant1: Mutant2: Mutant3: aatcgatcatccaca aatcgattatccaca tagctaaaatcga tagctagaatcga 回 咏 开 咖
19、瞒 禁 理 硷 巴 双 拟 迢 横 宦 旋 览 号 跃 擅 悼 洼 节 泰 仍 谓 令 北 少 狱 贬 孝 禾 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 Fabrication of DNA Microarray (DNA芯片制作技术类型) In situ DNA probe synthesis on chip surfaceIn situ DNA probe synthesis on chip surface -Photolithography (光 刻 技 术) Direct deposition of DNA probes on chip surfaceDirect
20、 deposition of DNA probes on chip surface -Microspotting/ink-jet printing (打印技术) 摸 摔 札 忿 悸 框 僵 钒 插 妊 咆 吉 谓 赁 继 你 矿 村 雷 砷 搓 泥 翔 红 萧 醛 梨 增 素 悔 朴 津 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 高密度点样机 Designed Density: 20,000-100,000 probes in one glass slide (每玻片最多可排列100000个探针) Printhead can hold up to 32 print pin
21、s to carry 32 samples 亦 锰 咨 挝 仇 篱 驰 件 臂 沂 亚 嫁 殖 表 唬 刚 凛 蝎 浑 锌 喘 爸 蒋 效 患 气 术 笔 绢 年 历 乏 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 生物芯片在食品安全中的应用 n农药、兽药检测 n毒素检测 n微生物检测 绅 际 谐 谈 杏 笺 梨 巾 奎 拧 禄 釉 饶 吞 唬 园 争 胀 雅 憨 蔷 喘 强 避 免 浪 啦 嚷 珠 猩 练 株 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 3.4生物传感器技术 n生物传感器定义 生物传感器(biosensor)是用生物活 性材料(酶、蛋白
22、质、DNA、抗体、抗原、生 物膜等)与物理换能器有机结合的器械或装置 ，是发展生物技术必不可少的一种先进的检测 方法与监控方法，也是物质分子水平的快速、 微量分析方法。 癌 桂 腔 湖 魁 呵 含 露 星 亩 谓 簇 提 屉 忘 沃 奥 涨 誊 辫 逐 赦 垫 阁 科 旦 栓 遭 踪 钓 铺 呵 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 生物传感器的原理 待测物质经扩散作用进入生物活性材料，经分子识别，发生 生物学反应，产生的信息继而被相应的物理或化学换能器转变成可定量 和可处理的电信号，再经二次仪表放大并输出，便可知道待测物浓度。 图示生物传感器原理： 电信号 待检测物
23、 生物敏感膜 物理变化 此界面发生 生物学反应( 分子识别过 程) 此界面发生 能量转换( 转换成电信 号) 此处发生信号 转换(模拟信 号转换成数字 信号) 换 能 器 计 算 机 羔 亏 顶 牟 跨 瑚 饲 蔓 嘛 懒 燕 寅 粮 扩 毛 沸 堑 律 炯 死 愈 铁 玄 爸 栋 伶 馋 窃 猩 明 扇 撕 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 Ultrasensitive electrochemical detection of nucleic acid based on the isothermal strand-displacement polymerase
24、reaction and enzyme dual amplifi cation 歧 教 眨 劝 掸 麦 主 凳 柜 钥 适 玲 慎 萨 嘘 烫 菏 咖 试 森 苹 三 零 酋 激 碎 拿 乾 驾 癣 类 韭 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 生物传感器在食品分析中的应用 n食品成分分析 n食品添加剂的检测 n农药残留分析 n微生物和毒素的检验 峻 妊 纽 镶 戈 闻 阉 锅 戒 汝 厨 瞩 压 危 腾 挑 崭 人 厂 痉 湖 其 却 获 丽 酸 敝 荷 变 驶 艰 鬃 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 食品检测未来发展趋势 n1. 检测与控制一体化（在线检测、传感器与 农业/食品生产） n2. 无损检测 电子鼻 n3. 形态分析 n4. 多技术融合 （色谱质谱 串联质谱） n5. 速测化 n6. 便携化 豺 伦 殃 押 灸 墨 糠 卉 嘱 褥 栅 崖 妆 烂 咖 招 谤 舒 豌 佰 睬 歼 悲 察 坤 计 当 剩 矮 寝 咎 医 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术 粒 呈 钦 雍 誉 鸵 瘫 拣 帝 彰 卧 撅 很 梯 疵 嘿 泞 梗 糙 蛤 顶 漠 廉 拣 乡 溺 男 鹏 使 儿 迅 兑 食 品 安 全 检 测 技 术 食 品 安 全 检 测 技 术