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1、第8章 细菌感染的检查方法与防治原则,病原菌检测：检测病原菌及其抗原、代谢产物或核酸,病原菌检测：形态、分离与鉴定 病原菌抗原的检测 其他检测法：PCR等,第一节 细菌感染的诊断,血清学诊断：检测患者血清中特异性抗体,标本的采集 和送检原则,无菌操作,早期采集,做好标记,尽快送检,一、病原菌检测 （一）标本的采集与运送,适当标本,（二）细菌分离培养与鉴定 1、细菌培养 接种于适当培养基，根据菌落特征作初步鉴别。 2、形态学检查 （1）不染色标本检查法 压滴法、悬滴法，用暗视野显微镜或相差显微镜检查 （2）染色标本检查法 革兰染色法、单染色法、抗酸染色法、特殊染色法,3、生化试验 现已有多种微量
2、、快速的生化反应试剂盒以及半自动或全自动检测仪器应用于临床。 4、血清血鉴定 已知Ab(多价、单价诊断血清）查未知Ag,常作玻片凝集试验，确定细菌的种、型。 5、动物试验 分离、鉴定致病菌，测定某些细菌的毒力；常用小鼠、豚鼠、家兔等。 6、药物敏感试验 对指导临床选择用药，及时控制感染具有重要意义。,致病菌的分离和鉴定,药物敏感试验,标本,培养特征,形态特征,生化试验,血清学鉴定,动物试验,培养基,优点： 不受抗生素使用的限制 敏感性高 1、酶免疫技术（EIA） 酶联免疫吸附法、酶标免疫组化法 2、协同凝集试验 3、免疫荧光技术（IF）荧光菌球法 4、对流免疫电泳（CIE） 5、免疫印记技术,
3、（三）病原菌抗原的检测,（四）病原菌核酸的检测 不同的细菌具有不同的基因结构，通过测定细菌的特异性基因序列进行比较和鉴定。 1、核酸杂交技术 2、PCR技术 3、基因芯片（gene clips）技术,PCR,二、血清学诊断,原理 用已知Ag检测患者血清中未知Ab及其效价的变化，可作为感染性疾病的辅助诊断。 双份血清 恢复期或一周后血清抗体效价比早期升高4倍以上（含4倍），可确诊。 种类 直接凝集试验（肥达试验） 补体结合试验、中和试验 乳胶凝集试验、ELISA,人工免疫,人工主动免疫 artificial active immunization 疫苗（vaccine） 类毒素,人工被动免疫 a
4、rtificial passive immunization 抗毒素 抗菌血清 丙种球蛋白 其他免疫制剂,第二节 细菌感染的特异性预防,一、人工主动免疫 将疫苗及类毒素（抗原）接种于人体，使机体主动产生获得性免疫力。主要用于预防。 （一）疫苗 第一代疫苗：死疫苗、活疫苗 第二代疫苗：亚单位疫苗、基因工程疫苗 第三代疫苗：DNA疫苗（核酸疫苗） 1、死疫苗：伤寒、霍乱、流脑、钩体病等死疫苗。 2、活疫苗：BCG、鼠疫、炭疽、脊髓灰质炎、麻疹等减毒活疫苗。,两种疫苗优、缺点比较,活疫苗 接种次数 1次 接种剂量 小 接种反应 轻/隐性感染 免疫类型 体液、细胞 免疫时间 持久 稳定性 差 毒力回复
5、 有可能 安全性 免疫缺陷者危险,死疫苗 2-3次 大 明显 体液 短暂 强 无 好,2、亚单位疫苗(subunit vaccine) 利用微生物的保护性抗原制成的不含有核酸、能诱发机体产生免疫应答的疫苗。如肺炎球菌、脑膜炎球菌荚膜多糖疫苗。 3、基因工程疫苗 利用基因工程技术把编码病原体保护性抗原表位的目的基因，导入原核或真核表达系统后，用表达的保护性抗原所制成的疫苗。,4、核酸疫苗（nucleic acid vaccine）也称DNA疫苗，将编码保护性抗原的基因重组到质粒真核表达载体上，然后将重组的质粒DNA直接注射到宿主体内，外源基因在体内表达的抗原刺激机体的免疫应答。 （二）类毒素 是
6、用细菌的外毒素经0.3%0.4%甲醛处理后，其毒性消失但保留免疫原性。如白喉、破伤风类毒素。,二、人工被动免疫 输入含有特异性抗体的免疫血清、纯化免疫球蛋白抗体或细胞因子等免疫制剂，使机体立即获得特异性免疫力的过程。 抗毒素 用细菌类毒素多次给马注射，待其产生大量抗体后，放血并分离马血清经提纯后制成的制剂。如TAT、TDT等。 抗菌血清,丙种球蛋白 （1）血清丙种球蛋白 从正常人血中提取的免疫球蛋白（IgG、IgM）。 （2）胎盘丙种球蛋白 从胎盘血中提取的免疫球蛋白（IgG）。 其他免疫制剂,两种人工免疫方法的比较,第三节 细菌感染的治疗,抗菌药物的种类 抗菌药物的主要作用机制 抗菌药物的存在问题,1. 标本采集与送检时应注意什么？ 2. 试比较人工主动免疫和人工被动免疫的不同点。 3. 试解释：人工主动免疫、人工被动免疫、亚单位疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗 。,复习思考题,