空气微生物监测标准操作规程[专业教学].doc

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1、空气微生物监测标准操作规程1. 目的:正确进行空气微生物监测一、采集指征:1. 医院感染监控重点科室,每月常规监测。2. 发生医院感染暴发流行时。2、 采集方法:平板暴露法1. 采样时间:在消毒处理后、操作前进行采样。2. 采样高度:与地面垂直高度80150cm。3. 布点方法:室内面积30,设内、中、外对角线3点,内、外点布点部位距墙壁1m处;室内面积30,设4角及中央5点,4角的布点部位距墙壁1m处。4. 采样方法:将普通营养琼脂平板(直径9cm)放在室内各采样点处,采样高度为距地面1.5m采样时将平板盖打开,扣放于平板旁,暴露5min,盖好立即送检。3、 平板暴露法结果计算公式:将平板置

2、37温箱内培养24h计数菌落。 空气细菌菌落总数(CFU/m3)=50000N/(AT)式中 A为平板面积(cm2); T为平板暴露时间(min); N为平均菌落数(cfu)。4、 结果判定类区域:细菌总数10cfu/m3(或0.2cfu/平板),未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格;类区域:细菌总数200cfu/m3(或4cfu/平板),未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格;类区域:细菌总数500cfu/m3(或10cfu/平板),未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格;5、 注意事项1. 采样前,关好门、窗,在无人走动的情况下,静止10min进行采样。2. 平皿应新鲜

3、透亮,在保质期内。2.目的:正确进行物体表面微生物监测1、 采集指征1. 医院感染监控重点科室,每月常规监测。2. 发生医院感染暴发流行时。2、 采集方法1. 采样时间:在消毒处理后4h内进行采样。2. 采样面积:被采表面100cm2,取全部表面;被采表面100cm2,取100cm2。3. 采样方法:用5cm5cm的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,采样面积100cm2,连续采样4个,用浸有蒸馏水的无菌棉拭子1支(最好用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子),在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次,并随之转棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投入5ml含蒸馏水的试管中(最好是含相应中和剂的无菌洗脱液试

4、管内),立即送检。4. 门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。3、 结果计算方式:物体表面细菌菌落总数检查:0.5ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,放35温箱内培养2448h计数菌落。(cfu/cm2)=平板菌落数采样液稀释倍数/采样面积(cm2)4、 结果判断:、类区域工作人员:细菌总数5cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。类区域:细菌总数10cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。类区域工作人员:细菌总数15cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌为消毒合格。3.目的:正确进行医务人员手的微生物监

5、测一、采集指征1. 医院感染监控重点科室,每月常规监测。2. 发生医院感染暴发流行时。2、 采集方法1. 采样时间:在接触患者或从事医疗活动前进行采样。2. 采样面积及方法:被检人五指并拢,将浸有蒸馏水的无菌棉拭子1支在双手曲面从指根到指端来回涂擦各两次(一只手涂擦面积约30cm2),并随之转动采样棉拭子,剪去手接触部位,将棉拭子放入装有5ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米cm2计算。3、 结果计算方式:0.5ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,放35温箱内培养2448h计数菌落。手细菌菌落总数(cfu/cm2)=平板上菌落数采样液稀释倍数3024、 结果判断、类区域工

6、作人员:细菌总数5cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。类区域:细菌总数10cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。类区域工作人员:细菌总数15cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的医护人员手不得检出沙门菌为消毒合格。4.目的:正确进行医疗用品的微生物监测一、采集指征1. 医院感染监控重点科室,每月常规监测。2. 发生医院感染暴发流行时。二、采集方法1. 采样时间:在消毒或灭菌处理后,存放有效期内采样。2. 采样量及采样方法:可用破坏性方法取样的医疗用品,如输液(血)器、注射器和注射针等均参照中华人民共和国药典2000年版二部附录中“无菌检查法”

7、规定执行。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品,可用浸有无菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样,被采表面100 cm2,取全部表面;被采表面100 cm2,取100 cm2。3. 无菌检查:参照中华人民共和国药典2000年版二部附录中“无菌检查法”。三、结果计算方式:1ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,放37温箱内培养2448 h计数菌落。物体表面细菌菌落总数(cfu/ cm2)= 平板上菌落数采样液稀释倍数采样面积(cm2)4、 结果判断标准:进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。接触粘膜的医疗用品细菌菌落总数20 cfu/g或100

8、cm2, 不得检出病原微生物。5.目的:正确进行血液和腹膜透析所用的水及透析液的微生物学监测一、采集指征1. 医院感染监控重点科室,每月常规监测。2. 发生医院感染暴发流行时。2、 采集方法采样点:透析用水出口( 自来水经过过滤、软化、活性炭吸附、去离子逆渗透等步骤处理后的出口)、透析液出口 (即透析结束时透析液离开透析器的出口)。如疑有透析液污染或严重感染病例,应增加采样点,如原水口、透析液配比机、反渗水出口、贮水罐出口、透析液进口等。三、培养结果计算方式:取透析用水或透析液1ml放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,放37温箱内培养2448 h计数菌落。细菌菌落数(cfu/ ml)= 平板上菌落数采样液稀释倍数所取液体的容积(ml)4、 结果判断标准:透析用水的细菌落菌总数100cfu/ml;透析结束时,透析液细菌落菌总数2000cfu/ml,并且无致热原物质存在。4教辅工具b

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