无菌室操作规程.doc

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1、无菌室操作规程1.目的本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。2.安全注意事项严格无菌操作,防止微生物污染;操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。3.规程3.1 无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。3.2 严防一切灭菌器材和培养基污染,已污染者应停止使用。3.3 无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁,以保证无菌室的洁净度符合要求。3.4 需要带入无菌室使用的仪器,器械,平皿等一切物品,均应包扎严密,并应经过适宜的方法灭菌。3.5 工作人员进入无菌室前,必须用肥皂或消毒液洗手消毒。3.6 无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上,并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕,

2、应及时清理无菌室。3.7 供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染。检查前,用75的酒精棉球消毒外表面。3.8 每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠性。3.9 吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管。3.10 接种针每次使用前后,必须通过火焰灼烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物。3.11 凡带有活菌的物品,必须经消毒后,才能在水龙头下冲洗,严禁污染下水道。3.12 无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下,取内径90mm的无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45的营养琼脂培养基约15ml,放至凝固后,倒置于3035培养箱培养48小时,证明无菌后,取平板35个,分别放置工作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于3035培养箱培养48小时,取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落,10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度,应对无菌室进行彻底消毒,直至重复检查合乎要求为止。

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