《NM23H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株蛋白质组差异表达的研究课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《NM23H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株蛋白质组差异表达的研究课件.ppt（21页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、KAI1基因在人肺癌细胞株中表达水平及调控机制的研究,本研究受到国家自然科学基金重点项目（N0.30430300）和天津市科技支撑计划重点项目（No. 06YFSZSF05300）资助,尤嘉琮1 赵颖2 陈 军1 马 力1 朱大兴1 周清华 1 1、天津医科大学总医院天津市肺癌研究所 2、四川大学华西医院肿瘤中心,一、研究不同组织学类型的人肺癌细胞株和正常人肺成纤维细胞株MRC-5中KAI1的mRNA表达水平及其差异,二、研究不同转移潜能的人大细胞肺癌细胞株中KAI1的mRNA表达水平，探讨KAI1与nm23-H1在调控肺癌转移中的相互关系,三、研究甲基化抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-Aza-C
2、dR)对肺癌细胞株L9981、GLC-82和NCI-H460中KAI1的mRNA表达水平和体外增殖能力的影响,研究目的,主要材料与方法,实验用细胞株：MRC-5：正常人肺成纤维细胞株L9981：人高转移大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1：稳定转染nm23-H1基因的L9981细胞株NL9980：人低转移大细胞肺癌细胞株肺腺癌细胞株：A549、GLC-82、A2，SPCA-1和LTEP-2人大细胞肺癌细胞株：NCI-H460人小细胞肺癌细胞株：SH-77和NCI-H446肺鳞癌细胞株：YTMLC-90,主要实验方法： 实时荧光定量PCR MTT法绘制细胞生长曲线,甲基化抑制剂： 5-杂氮
3、脱氧胞苷 (5-Aza-CdR),实 验 结 果,比较MRC-5与不同组织类型肺癌细胞株间KAI1基因mRNA表达水平,1. MRC-5 , 正常人肺成纤维细胞株；2. L9981, 人高转移大细胞肺癌细胞株；3. NL9980,人低转移大细胞肺癌细胞株；4. L9981-nm23-H1-pEGFP，稳定转染nm23-H1的L9981细胞株；5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌细胞株；9. NCI-H460，人大细胞肺癌细胞株；10. SH-77，11. NCI-H446，人小细胞肺癌细胞株；12. LTEP-2，肺腺癌细胞株;13. YTMLC-90，肺
4、鳞癌细胞株；,P=0.0000.002,不同细胞株间KAI1基因表达水平比较的P值表,1. MRC-5 , 正常人肺成纤维细胞株；2. L9981, 人高转移大细胞肺癌细胞株；3. NL9980,人低转移大细胞肺癌细胞株；4. L9981-nm23-H1-pEGFP，稳定转染nm23-H1的L9981细胞株；5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌细胞株；9. NCI-H460，人大细胞肺癌细胞株；10. SH-77，11. NCI-H446，人小细胞肺癌细胞株；12. LTEP-2，肺腺癌细胞株; 13. YTMLC-90，肺鳞癌细胞株；,在L9981细胞中
5、转染nm23-H1可显著上调KAI1的mRNA表达水平,1. L9981；2. NL9980；3. L9981-nm23-H1-pEGFP,比较L9981细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平,1.L9981；2. A549；3. GLC-82；4. A2；5. SPCA-1；6. NCI-H460；7. SH-77；8. NCI-H446；9. LTEP-2；10. YTMLC-90,比较NL9980与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平,1. NL9980；2. L9981-nm23-H1-pEGFP；3. A549；4. GLC-82；5. A
6、2；6. SPCA-1；7. NCI-H460；8. SH-77；9. NCI-H446；10. LTEP-2；11. YTMLC-90,比较A549细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平,1.A549；2. GLC-82；3. A2；4. SPCA-1；5. NCI-H460；6. SH-77；7. NCI-H446；8. LTEP-2；9. YTMLC-90,比较GLC-82细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平,1.GLC-82；2. A2；3. SPCA-1；4. NCI-H460；5. SH-77；6. NCI-H446；7. LTEP
7、-2；8. YTMLC-90,比较A2细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平,1. A2；2. SPCA-1；3. NCI-H460；4. SH-77；5. NCI-H446；6. LTEP-2；7.YTMLC-90,比较SPCA-1细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平,1. SPCA-1；2. NCI-H460；3. SH-77；4. NCI-H446；5. LTEP-2；6.YTMLC-90,比较NCI-H460细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的表达水平,1. NCI-H460；2. SH-77；3. NCI-H446；4. L
8、TEP-2；5.YTMLC-90,比较SH-77细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平,1. SH-77；2. NCI-H446；3. LTEP-2；4.YTMLC-90,比较NCI-H446、 LTEP- -2和YTMLC-90细胞株间KAI1的mRNA表达水平,1. NCI-H446；2. LTEP-2；3.YTMLC-90,5-Aza-CdR上调了NCI-H460 和L9981细胞中KAI1的mRNA表达水平,1. Control ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdR,NCI-H460和L9981细胞株对照组与实验组
9、间KAI1基因表达水平比较的P值表,1. Control ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdR,NCI-H460 cells,L9981 cells,5-Aza-CdR对GLC-82细胞中KAI1的mRNA表达水平无显著影响,1. 对照组 ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdR,GLC-82细胞株对照组与实验组间KAI1基因表达水平比较的P值表,5-Aza-CdR能够抑制人肺癌细胞株NCI-H460、L9981的增殖,5-Aza-CdR对人肺癌细胞株GLC-82的增殖无显著影响,结 论,1、不同组织学类型人肺癌细胞株中KAI1基因mRNA表达水平均显著低于正常人肺成纤维细胞株MRC-5；2、不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株中KAI1基因mRNA表达水平有明显差异，nm23-H1基因转染能显著上调人高转移大细胞肺癌细胞株中KAI1基因mRNA表达水平；3、5-Aza-CdR能显著上调人肺癌细胞株L9981和NCI-H460中 KAI1基因mRNA表达水平，并能够抑制其体外增殖能力。,NM23H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株蛋白质组差异表达的研究,21,谢谢,