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1、 文章编号 1 0 0 7 一 0 8 9 3 ( 2 0 0 3 ) 一 0 2 一 0 0 7 8 一 0 2 实验性脾虚大鼠红细胞的MD A含量变化 贾 军曲瑞瑶章 敏郭华 首都医科大学生理教研室( 北京1 0 0 0 5 4 ) 摘 要 目 的 为了 探讨实 验性脾虚证的发病机理以及四君子汤加味对脾虚的治疗作用。 方法 我们 检测了各组大鼠红细胞中丙二醛( M D A ) 的含量， 并对其进行了比较。 结果发现脾虚大鼠红细胞中的M D A含 量较正常对照组显著升高， 四君子汤加味治疗后M D A的含量可基本恢复正常水平。结论实验性脾虚大鼠 可引起细胞脂质过氧化物的异常改变， 四君子汤加
2、味可起到一定的治疗作用。 关键词 实 验性脾虚; 红细胞; 丙 二醛; 大鼠 中图分类号) R - 3 3 2 ; R 2 5 6 . 3 文献标识码 A C h a n g e s o f C o n t e n t o f E r y t h r e n t a l S p l e e n D e fi c i e n c y MDA i n E ta t s J ia J u n ， Q u R u iy a o ， Z h a n g M in ， G u o H u a of P h y s io lo g y ， C a p it a l U n iv e r s ity of M
3、 e d ic a l S c ie n c e s ( B e ij ia n g 1 0 0 5 4 O b je c t iv e T o i n v e s t i g a t e m e c h a n i s m s o f e x p e r i m e n t a l s p l e e n d e fi c i e n c y a n d t h e r a p e u t i c a l e ff e c t o f d e c o c t i o n o n s p l e e n d e fi c i e n c y . M e t h o d s T h e c o
4、n t e n t o f c h a n g e s w e re c o m p a r e d a m o n g d i f f e re n t g r o u p s .R e s u lt s C o n t e n t e x p e n n e n t a l s p l e e n d e f i c i e n c y g ro u p w e re s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h a t o f t h e c o n t r o l g ro u p . re c o v e r e d t o t
5、h e n o n n a l a ft e r t h e y w e re t r e a t e d w i th s u p p l e m e n te d f o u r g e n t l e m a n d e c o c t io n . ( s p l e e n d e fi c i e n c y r a t s c a n c a u s e d i s o r d e r o f li p i d p e ro x i d a t i o n o f e r y t h r o c y t e s a n d s u p p l e m e n t e d f o
6、u r g e n t l e m a n d e c o c t i o n h a v e t h e r a p e u t i c e ff e c t o n e x p e r i m e n t a l s p l e e n d e f i c i e n c y . ( K e y w o r d ) E x p e r im e n t a l s p l e e n d e fi c ie n c y ; E ry th r o c y t e ; M D A ; R a t s 脂质过氧化是氧自由 基引起组织损伤的主要机 理， 可形成脂质过氧化物， 并与许多疾病的发生发
7、展 有密 切关系 1 。丙 二 醛 ( m a lo n d ia ld e h y d e , M D A ) 是 脂 质过氧化反应中重要的中间产物， 它可严重损坏细胞 膜组 分、 结 构和功能 2 1 。 本实 验通过 测 定 脾 虚大鼠 红 细胞中的丙二醛的含量， 间 接反映了 脾虚大鼠红细胞 受自由 基攻击的情况， 并探讨四 君子汤加味在治疗脾 虚证的可能机理。 1 材料与方法 1 . 1 试剂和仪器M D A测定试剂由南京建成 生物工程研究所提供; 用上海第三分析仪器厂7 2 3 分 光光度计进行吸光度值测定。 1 . 2 动物模型的制备及分组实验选用雄性 W i s t a r 大
8、鼠， 鼠 龄8 0 一 1 0 0 d ， 体重1 2 0 一 1 7 0 g ， 由 首都 医科大学实验动物中心提供。按本实验室建立动物 模型的常 规方法 3 1 ， 将大鼠 随 机分成4 组， 正常 对 照组: 隔日 灌胃， 每日2 次自 来水， 每次3 m l ， 正常饮 食， 喂养4 2 d o脾虚组: 将大黄、 厚朴、 积实按3 ; 3 ; 2 的比 例熬制成1 0 0 %的煎剂( 1 以m l ) , 隔日 灌胃， 日2 次， 每次3 m l ， 喂养4 2 d 制成脾虚大鼠。自然恢复 组: 按脾虚组方法造模后， 隔日 灌胃， 每日2 次自来 水， 正常饮食， 喂养2 1 d o四
9、君子汤加味治疗组: 按 收稿日 期 2 0 0 2 - 0 9 - 0 4 作者简介 贾军( 1 9 7 2 一 ) ， 男， 陕西人， 助教， 主要从事生理学和神经生物学研究。 万方数据 脾虚组方法造模后， 用四君汤加味( 炙黄茂: 党参: 获 荃: 白术: 炙甘草按2 : 2 : 2 : 2 : 1 比例) 制成 1 0 0 %的煎 剂， 隔日 灌胃， 日2 次， 每次3 m l ， 正常饮食， 喂养2 1 d o 1 . 3 红细胞M D A含量的测定取肝素抗凝全 血， 按照南京建成生物工程研究所M D A测定试剂盒 的说明书进行测定。 1 . 4 数据处理 各组数据采用( 均数t 标准
10、差) 表示， 组间差异的显著性进行 t 检验。 2 结果 2 . 1 动物模型的一般状况造型过程中， 对照 组大鼠毛色润泽， 进食量大， 体重呈自 然上升变化; 而 脾虚大鼠毛发枯搞， 纳呆、 怠惰， 便塘， 体重减轻， 但无 急性泄泻， 出现了虚证。自然恢复组大鼠上述虚证没 有较好的恢复， 而四君子汤加味治疗组大鼠虚证得到 较好的恢复。 2 . 2 各组大鼠红细胞中M D A的含量比较见 表 1 。 表 1 各组大鼠红细胞中MDA MDA 的含皿x 士、 ) 含量( c B / m m o l “ L - ) 04一U4 目.1，.1心.1，.且 正常对照组 脾虚组 自然恢复组 治疗组 注:
11、 与正常对照组比较 虚组比较 P 0 . 0 5 ) 。另外， 脾虚大鼠在自 然恢复状态下红细胞的M D A含量与脾虚组比较也 未见差异， 但与正常组比较还是有一定差异( 尸 0 . 0 5 ) 。 3 讨论 丙二醛( M D A ) 是脂质过氧化降解的中间产物， 脂质过氧化作用可严重破坏细胞成分、 结构和功能。 因此， 测定M D A的含量常常可以 反映机体内脂质过 氧化的程度， 间 接反映出 细胞受损伤的程度。脾虚动 物 血 浆M D A 含量升高的 报 道较多 4 ,5 1 ， 本研究一 步 证实脾虚大鼠细胞膜M D A亦增高， 两者具有一定的 相关性。红细胞含有多种免疫分子， 参与机体
12、的非特 异性免疫， 对疾病的发生、 发展有一定的影响。有研 究 提示血浆M D A升高， 尤其是红细胞膜M D A升高， 可以 严重影响红细胞膜上存在的具有免疫粘附活性 的多 种受 体的活性， 引 起免疫功能 低下 6 l o M D A水 平变化是脾虚证非特异性免疫功能失调的重要指标 之一。正常情况下， 体内自由 基产生与清除处于动态 平衡， 但是这种平衡一旦破坏， 则会导致红细胞氧化 损伤。膜脂质过氧化物M D A增多可造成膜损伤， 从 而影响膜功能。因此， 通过观察脾虚大鼠红细胞脂质 过氧化作用的功能变化， 将有助于进一步揭示脾虚证 的机理。 本实 验采 用 破气 苦降 加饮 食失 节法
13、 7 l ， 造成大鼠 脾气虚证。厚朴、 积实过用能耗气伤中， 大黄性苦寒， 用量较少， 取其苦降， 逆“ 脾主升清” 之用， 因而造成了 脾虚证。脾失健运， 气血生化能力下降， 表现为免疫 功能低下、 “ 百病由生” ， 因而出现了怠惰， 便澹， 体重 减轻等症状。同时， 试验结果也表明了 脾虚组红细胞 M D A的 含量较正常对照组M D A的含量显著升高， 说 明 脾虚组大鼠 红细胞受到了 严重的损伤。 本实验用四君子汤加味来治疗脾虚证大鼠， 可见 治疗组大鼠红细M D A含量与正常组比较无差异， 说 明四 君子汤加味能降低组织中M D A的含量， 通过抗 氧化实现对机体的 保护作用;
14、同时可促进脾的运化功 能， 改善机体的各种虚损状况， 使气血生化 有源， 血液 生成的质和量得以保证， 这与中医的脾为“ 气血生化 之源” 认识一致。 自 然恢复组和正常对照组比较， 其红细胞M D A 的含量仍然较高， 这表明脾虚后自 然状况下的恢复没 有治疗组的恢复好， 并不能完全达到治愈的目的。 参考文献 1 H a l li w e ll B . O x y g e n l o x ic it y , o x y g e n r a d ic a l s , t r a n s it io n m e t a ls a n d d i s e a s e ( J ) . B io c
15、h e m , 1 9 8 4 , 2 1 9 : 1 幻 J a in S K . T h e a c c u m u l a t i o n o f m a lo n y l d ia ld e h y d e , a n e n d o f p r i d u c t o f f a t ty a c id p e r o x i d a t i o n , c a n d i s t u r b a m i n o p h o s p h o 一l i p i d o r g a n i z a t i o n i n t h e m e m b r a n e b i l a y e
16、 r o f h u m a m e r y th r o c y t e ( J ) . B i o c h e m , 1 9 8 4 , 2 5 9 : 3 3 9 ( 3 曲 瑞瑶， 曲柏林， 曾文红， 等. 大鼠实验性脾虚证胃电波 和胃 运动的研究 J ) . 中国中西医结合杂志， 1 9 9 4 , 1 4 : 1 5 6 ( 4 章梅， 夏天， 行利. 脾虚大鼠红细胞和脂质过氧化物研究 ( J ) . 中国实验临床免疫学杂志， 1 9 9 5 , 7 ( 3 ) : 3 9 ( 5 王文波， 夏天， 魏辉. 脾虚证小鼠血清和胃 粘膜脂质过氧 化实验研究 J ) . 实用中西医结合杂志， 1 9 9 5 , 8 ( 2 2 ) : 1 5 3 0 ( 6 章梅， 邱根全， 夏天. 脾虚患者脂质氧化和红细胞免疫功 能关系 J ) . 安徽中医 学院 学报浏)0 1 , 4 ( 2 0 ) : 4 3 ( 7 劳绍贤. 脾虚证候的现代研究概况 J ) . 新中医, 1 9 8 5 , 1 7 ( 9 ) : 4 9 万方数据