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1、 8 浙江预防医学2 (X 刀年第19卷第8 期乃e i i 恻 氏v M ed， J ul v Z 仪 口 ， Vol lg， No. 8 杭白菊挥发油的抗菌抗炎作用及对P G E : 的影响 殷红黄越燕， 蒋小红王嘉2 【 摘要】目 的 研究杭白 菊挥发油抗菌抗炎作用及其可能的机制。方法 采用体外抗菌法、 小鼠耳壳二 甲 苯肿胀法、角叉菜胶致大鼠 足趾肿胀法， 观察不同 浓度和剂量杭白菊挥发油对细菌和炎症的影响， 并检测 P G EZ的 含量。结果 杭白 菊挥发油有明显的 抗菌效果; 对二甲 苯致小鼠 耳壳肿胀、角叉菜胶致大鼠足肿胀有 抑制 作用， 并能 减 少1 凡的 含 量。 结 论
2、杭白 菊 挥 发 油 有 抗 菌 抗炎作 用， 其 抗炎 作用可能 与 抑制p G E Z 的 产 生有关。 【 关键词】 杭白 菊; 挥发油; 抗菌; 抗炎; 咒凡 中图分类号:R 一 332文献标识码: A文章编号:1 田7 一 田3 1( 2 以 ) 7 ) 08刃 侧 犯 仍 The an往 笼 详 此即d胡幼 如怪 明 朋 圈 勿 灯 e 伟 改 七可R 韶 0 赎 移 an th e l 址 e 义 祀 n 七 al威 朋dits 如 门 u O I c eon 邢 瓦 ) 勃 心枷烤 ， 月 以 刁 刀 1 飞 记 一 尹 盯 王 ， j 阴 八 吟叉 必 介 肠移 ， 己心(
3、而 戏 油 堵对 缸 如亡 Q 亿 芳 已 ， 人 诚诊 ， 乃承叮， 3 1 1( X X ) ， 以认 ; 乃护 油 若 匆 七到 公 刀 之 。 口 娜， 物刀 刻咖， 豁 砂功 召 ， 3 1 0053 ， 以抽. ) 【 A 饭 泊 门 Ct 】 ( 戮 iec v e Toinvesti 脚。 the anti哪 : an d anti一 infl州ory e ff t s ofR 、C luysanth 丽 tial oilan d 衅幻 bl e 卜 即 i sm. M 日 如 以 地 Invi troan t i ba c t erialac ti vi ty田 1 ( 】
4、anti 一 i ll fl s 甩 na t ory 田 锐t s ofR os已巧 咧 l t ll e n 垃 ti aloil were山 se 口 以 l in耐耐 1 侧 x le lsi 耐诚ng 而cewi thearl华 日 w e l l记 b ydi m e th y 肤毗n e明 dlats wi 出t o 5 认 U 司 b y 助 叮 昭 忱 n aJ I ， 助 d t hec 咧ents ofP( 二 凡was detec 喇 att he，ti me. R es ul tS l l le an 曲a c t 翻alac ti vi tyofn ，C 卜 巧 翩
5、n h e ll 五 ti 习 011、 滋 咨 涌caltt ， It创 ” I ldi南bit the swel 1 眼ofe ar叩 ， 朋 dtoes eau刻 场di m e ih y l be l此11 e an d c 血ag ee 口 出 1 似详 兄 t i vely ， 阴 dd 仪 :l the l e v e l 苗R ; E Z . C O I 记u 幼 0 刃 R osC ll叮 洲记 1 丽 记默m ialoil h as出 l t i se ps is肚 ldanti - 1 心助 扣 坦 t o 刁e 玉c t : 咖chn 坦 y c o 耽】 a te 杭
6、 thth e in 卜 ib iti onofPG凡. I K eyw o n 如 n osc l l刁 san小 丽 ; E ssent i公。 11 ; 枷ise p s l s ; 彻行 一 1 祖 即 卫 1 习 加 ry ; 此E Z 菊 花 为 菊 科 菊 属 植 物以 。 ， 山 司 翻 了姗乙 mDrli 哪尺 田 矛咧的 干 燥头状花序。杭白菊是著名的浙八味之一。是国家卫生部 第一批批准的药食同源的道地药材之一， 是防治心血管疾 病的 优良 天然 药物 一 3 1 ) 。 而 在 杭白 菊 挥 发油的 药理作用方 面尚 无报道。本实验对杭白菊挥发油的抗菌抗炎作用进行 了研究
7、， 并初步探讨了其抗炎机理。 材料与方法 1 实验动物SD大鼠，早， 体重1 50一 1 80 9 : Ic R 小鼠， 舍 早 各 半， 体 重18一 22 9 : 颗 粒 饲 料由 浙 江 省医 科院 实 验动 物中 心提供; 动物生产合格证号: S C x K( 浙)2 (X) 3 - 仪 幻 1 号。 2 受试药物 杭白菊购自 浙江桐乡三联菊花厂。将杭白菊 剪碎， 加12倍量的水， 用挥发油提取器按药典规定的方法 连续回流提取6 小时， 直至挥发油基本提尽， 提取液用乙 醚萃取， 无水硫酸钠脱水， 挥去乙醚得浅黄色气味特异芳 香的纯挥发油， 密闭于冰箱中 备用。临用前用0 ， 5 %的
8、吐温 配 成 所 需浓度的 杭白 菊挥发油口 服 液闭 。 角 叉菜胶 ( 批号 驯 叉 卜 07一1) 由 S lgn 坦公司提供，拜阿司匹灵 ( 批号 2 印 5 0 7 1 2) 由B ayer He扭C al e AG 提供。标准菌株大肠埃希 氏 菌 ( 尤 代 :C )( 批号25922 )绿脓假单胞菌 ( A T C C )( 批号 25 923 ) 金黄色葡萄球菌 ( A l C )( 批号2785 3) 由中科院生 物制品研究所提供。其他大肠埃希氏菌、 金黄色葡萄球菌 ( 4 株) 、 福氏痢疾杆菌、 伤寒杆菌、乙 付伤寒杆菌、痢疾杆 菌由嘉兴学院医学院微生物教研室提供。其余的
9、试剂均为 分析纯。 结 、果 1 杭白 菊挥发油对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀及p G 乓含量 的影响 选择正常健康雄性 SD 大鼠50只， 按体重随机分 基金项 目:嘉兴市科技局资助项 目 ( 项 目编号 为5 组， 每组10只。给药方式为灌胃 空白对照为0 ， 5 %吐温生理盐水溶液， ， 给药容积为1 . 5 耐， 2 加5 A Y 3 043 T) 作者单位: 嘉兴学院医学院， 浙江 嘉兴 31 闷 议 X) ; 2 . 浙江医学高等专科学 校 阳性对照为0 阿司 生药 匹林， 杭白菊挥发油药液分高、中、低剂量， . 2岁吨 分别为 印、 30、 巧 岁 掩 。 每天灌胃 给 药1 次， 给
10、药后0 . s h ， 每只大鼠 左后足趾皮下注射 一 连续5 天。末次 1 %角叉菜胶生理 万方数据 浙江预防医学2 田7 年第 19卷第8 期 Z ll e li 绷 氏v M ed， J 己 v Z (X 刀 ， V ollg， No. 89 盐水溶液 0 . 1 诫致炎。于致炎后 40而n 、00而n 、1 2 0 而n 、 1 8 0 11 五 n 用游标卡尺分别测定大鼠左后足厚度， 计算肿胀度 和抑制率， 见表 1 。 表1 杭白菊挥发油对角叉菜 胶致大鼠 足趾肿胀的影响 ( n = 1 0) 剂量 ( 留k g ) 肿胀度 ( %) / 抑制率 ( %) 组别 日 朝 mi n
11、空白 对照组 阿司匹 林组 杭白 菊 挥发油 杭白 菊 挥发油 杭白菊挥发油 只， 随机分为5 组， 每组 10只， 雌雄对半。给药方式为灌 胃， 给药容积为0 . 3 mL ，空白对照为0 . 5 %吐温的生理盐水 溶 液， 阳 性对照 为0 . 2 岁 纯的阿司 匹 林， 杭白 菊挥发油药液 分 高、 中、 低 剂量， 分 别为生 药00、 30 、 巧 岁 纯 。 每 天 灌胃 给药 1 次， 连续3 天。末次给药 lh后，于左耳均匀涂布二 甲 苯50 匹， 右耳作对， 将小鼠 断椎处 死， 沿耳廓剪下两耳， 用7 Inln 直径打孔器在同一部位打下圆 耳片， 电 子天平精密称 重， 以
12、 下式计算耳肿胀度和肿胀抑制率， 见表4 。将处死动 物的脾脏、 胸腺分离， 精密称重并计算脏器指数， 见表50 20 . 2 1 7 . 4/1 2 . 9 1 6 . 8/1 6 . 2 14. 9 / 乃. 6 1 3 . 4 / 3 3 . 4 1 6 . 4/1 9 . 0 1 5 . 9 / 2 1 . 3 1 8 . 41 2 。 7 1 4 . 1 / 23. 3 1 2 . 4 / 2 . 6 1 8 . 3 /0. 51 2 . 7 / 一 18. 8/一n. 8 刀. 9 1 7 . 1 /6 . 91 2 2/4 . 3 表4 杭白菊挥发油对二甲苯致小鼠耳 肿胀的影响
13、( X s ，n = 1 0 ) l519. 0.2印30巧 与 对照 组比 较， P 值 0. 05 组别 剂量 ( 岁 吨 ) 0 . 0 0 . 2 60 . 0 3 0 . 0 1 5. 0 月 中 胀度 ( %) . 砧 土5 . 57 . 97 士5 . 40 份 肿胀抑制 率 ( %) 3003叫 致炎sh后断椎处死动物。 将大鼠 炎症左足齐躁关节剪 下， 剪碎捣烂后浸于装有s d生理盐水的试管中， 不时振 摇， lh后取出 。将浸泡液3 姗rpm 离心10 而 n ， 取上清液 2 00 风于试管内， 加0 . s m o F I KOH甲 醇溶液2 刃 1过 ， 50水 浴2
14、 0 n 五 1 1 异构化，加甲醇 s d，在278 Inn 波长下进行比色， 用吸光度 ( OD)表示邢玛含量， 见表20 将处死动物的脾脏、 胸腺分离， 分别以脾脏和胸腺重 与体重的百分比计算脾脏、 胸腺指数， 见表3 。 . 1 5土5 . . 卯 士4 . 1 7. 26 士1 . 0 . 00 1 2 . 5 6 1 6 . 20 7 . 7 0 2 0 . 3 1 21181819 空白对照组 阿司匹林组 杭白菊挥发油 杭白菊挥发油 杭白菊挥发油 与对照组比较， P 值 0.05 表5 杭白菊挥发油对二甲苯致小鼠 耳肿胀脏器指数的影响 ( x 士 5 ， n = 1 0) 体重
15、表2杭白 菊 挥 发 油 对 大鼠尤护的 影 响( 了 ， 5 ， n 二 1 0) 组别 844792 空白对照组 阿司匹林组 杭白菊挥发油 杭白菊挥发油 杭白菊挥发油 剂量 ( 以 k g ) 0. 0 0 . 2 印 . 0 3 0. 0 1 5. 0 增加值 4 1士0: 脾脏 指数 组别剂量 ( 厂k g )O D值 空白对照组 阿司匹林组 杭白菊挥发油 杭白菊挥发油 杭白菊挥发油 与对照组比较 0 . 0 0. 2 0 .7以5土0 . 07 0 . 5 5 25 土0 . 1 3 . 势 0 . 5 228士0 . 1 2 份 . 0 . 5 1 1 6士0 . 1 0 任 份
16、0 . 5 979士0 . 的 . 甘 4 . 85 士1 . 4 . 69 土0 4 . 卯 士1 . 6 1 4. 67 士1 . 的 胸腺 指数 0 . 闷 ( 幻 2 士0 . 08 0 ， 3 9 8 8 士0 . 08 0 . 肠7 5士0 . 田 0 . 4 1 3 1 士0 . 0 8 0叨 3 1士0. ( 万 0 . 5 2 6 54 士0肠 0 . 46 1 2士0 . 0 8 0 . 48 62 士0 . 0 8 0 . 488 7士0 . 0 8 0 . 49 1 8士0 . 肠 nCU 6030 巧 . P 值 0 . 05;铸 苦 P0 . 0 1 表6 杭白菊挥
17、发油的抗菌活性检测结果 药物浓度 ( 而L) 表3 杭白菊挥发油对角叉菜胶所致 菌种名称 10 . 50. 10 . 0510 . 50. 10 . 05 大鼠 足趾肿胀脏器指数的 影响 ( 了士 5 ， n = 10 ) 组别 剂量 ( 盯k g + 土 0505010303 肠05以以05 空白对照组 阿司匹林组 杭白菊挥发油 杭白菊挥发油 杭白菊挥发油 0 . 03 5 0 . 23 1 60 . 0 30 . 0 1 5. 0 体重胸腺 增加值指数 . 1 7士6 . 7 00 . 2 4土0 . . 7 8士6 . 3 70 . 27 士0 . . 印 士3 . 9 3 份 0 .
18、22 士0 . . 87 土3 . 7 00 . 22 士0 . . 1 5士5 . 2 10 . 23 士0 脾脏 指数 0 . 27 土0 . 0 . 27 土0 . 0 . 24 士0. 0 . 24 士0 . 0 . 26 士0. + 十 份 与对照相比较， P 值 0 . 05 金黄色葡萄球菌 ( A T C C) 大肠埃希氏 菌 ( ATc C) 绿脓假单胞菌 ( A lr C C ) 金黄色葡萄球菌 ( 4 株) 大肠埃希氏菌 福氏痢疾杆菌 伤寒杆菌 乙付伤寒杆菌 痢疾杆菌 阴性对照 阳性对照 303037 十+ 2 对二甲 苯所致小鼠耳廓肿胀实验 选择正常健康小鼠50( 下转第
19、 ， 2页) 万方数据 1 2 浙江预防医学2 (X7 年第 19卷第8 期乙 玲 1 1娜 P 沈 v M 饮 1 ， J 山 2 (X)7 ， V ollg， N O . 8 讨论 多糖广泛存在于动物细胞膜、 植物和微生物细胞壁中， 参与细胞的各种生命现象的调节。大量的药理和临床研究 表明， 一 些多糖类化合物具有免疫调节 作用， 它能激活 免疫细胞， 提高机体的免疫功能， 如香菇多糖、 云芝多糖、 猪菩多糖等提高因化疗所导致的免疫力低下， 并增强抗肿 瘤 作 用 ， 。 我们用荷瘤小鼠为模型，通过灌胃，I r S 后， 发现叨 5 不 仅能 提高小鼠的脾指数， 提高对小鼠 的抑瘤率6，
20、还能 提 高 血 清中珍含 量川、 诱 导 小鼠 脾 细 胞 产 生IL 一 2 和飞 刊 F 一 Q 。几一 2 是一种极为重要的淋巴因子， 它具有诱导Th 细 胞和Tc细胞增殖， 刺激B 细胞产生抗体， 增强 NK 细胞和 L A K 细胞活性及诱导干扰素产生等多种效应。 T 入 F 一 。 具有 广泛的免疫调节和免疫效应功能， 它能促凝血和提高白细 胞的 粘附和游走能力， 可调节巨噬细胞激活和组织中的免 疫反 应， 还能调节血细 胞生成和淋巴 细 胞发育。 够 是血清 抗体的主要成分，它具有抗感染、抗毒素、 激活补体、调 理吞噬细胞等多种免疫作用。这表明，I T S 能提高机体的免 疫功
21、能， ” 石还能够抑制场 二 荷瘤小鼠的生长， 且对马 。 荷 瘤小鼠的抑瘤效应呈现出明显量效关系， 提示，1 下 5 对肿瘤 细胞具有明显的抑制效应， 其抑瘤活性可能与其免疫增强 作用有关。 茶多糖是从粗老茶叶中提取， 对实验性荷瘤小鼠有明 显的免疫增强作用和抑瘤作用， 这对进一步研究开发茶多 糖为综合利用粗老茶， 提供了一种新依据。 茶多糖可能成 为一种颇有前途， 值得进一步开发的天然抗肿瘤药物。 参考文献 汪东风， 李俊，王常红， 等. 茶多糖的组成及免疫活性的研究 【 Jl. 茶叶 科学， 2 仪 xJ ， 20 ( 1): 45一 50 王庭欣， 朱惠民， 周明河. 植物多糖抑瘤活性
22、研究进展 【 J . 癌变畸变突变， 2 以 刃 ， 4 1( 2 ) : 1 1 8 一 1 20。 甘璐，张声华. 拘祀多糖的抗肿瘤活性和对免疫功能的影响 【 J. 营养学报2 印 3 ， 25 ( 2): 2 田一 2 工. U m巧，Na K ，Ch E M ，et al l lnlnu n Iln 仪 lu ating ac 6 访 ti es of 州y 撇c h “ des isola l 以 1 丘 o m p 山 旧 xginsen g 【 Jj . J M 曰 1 ，优 d Z 以 拜 ， 7 ( 1 ) :1 一 6 . 一一JIJ ，1， rLresL 幻引 【 5 聂
23、继盛， 祝寿芬. 猴头多糖抗肿瘤及对免疫功能的影响 【 J. 山西医药杂志2 (X)3 ， 32 ( 2):1 07一 1 00. 厂 6 c nangc l ，u ，J c ，K I 扣L .” 即 功 p ll 昭 e 娜， p 拟 刀 otes h j n 幻 r c ytot俪chy J C 田 I c e r 脉 ， 2 001 ， 6 1( 3 ) : 1 1 00一 1 1 肠 【 7 H aJ l sB， P aJ 人sH， 硫 KH， et以 . Poly sa c ( :haridei sol at 司份 mthe 拍 d j xof 讨 a 皿y c 司 。 脚l d i
24、 onunselec t ivelyactiv a t eS Bc e lland n la c 呷h 哪 bu t notT c ell ， Jl. 加一 1 咖IJn oP 卜 出 1 1坦 困 1 ， 2001 ， 1 ( 1 1 ) :1 肠9 一 7 8 . ( 收稿日 期: 2 (X 万 一 08一 1 5) ( 上接第9 页) 3 体外抑菌用比浊法将培养 6 小时的 12株细菌分别用 生理盐水稀释成1 护 / m l 的菌液浓度。将纯挥发油分散在热 水中， 酌量加人灭菌后的营养琼脂培养基中，得到0 . 05- I n 少L 的一系列浓度梯度的药物平皿， 每个稀释度两块平 皿。 将
25、稀释后的菌液分别接种于不同浓度的药物平皿上， 另外以 不含药物的培养基作为阳性对照， 不种菌种的作为 阴 性对照。将接种好的平皿置于37， 恒温箱中培养18小 时， 能够完全抑制细菌的最低浓度为该菌种的MIC 。 见表60 时各实验组的大小鼠体重与NS对照组相比， 除低剂量组大 鼠外均有下降， 其中高剂量组有显著差别 ( P 0 . 05) 。 杭白 菊挥发油体外抑菌实验表明， 不含药物的培养基 阳 性对照都有细菌生长， 而不种菌种的阴性对照都无细菌 生长。 对多种常见感染菌杭白菊挥发油都具有明显的抗菌 活性， M CI金黄色葡萄球菌 0 . 05 ( n il/L); 大肠埃希氏菌、 福氏痢
26、疾杆菌、 伤寒杆菌、乙 付伤寒杆菌、 痢疾杆菌0 . 5 - 0 . 01 ( n 方L); 绿脓假单胞菌0 . 01一 0 . 05 ( 】11/ L ) 。 抗菌作用 的机理还有待进一步研究。 讨论参考文献 杭白 菊挥发油对二甲苯致小鼠耳壳肿胀性炎症有明显 的抑制作用、对角叉菜胶致大鼠足肿胀有一定的抑制作用， 但作 用时间 较短， 能明 显减 少炎 症模型中邢玛的含量， 抗 炎作用可能与其抑制炎症介质邢马的产生有关。民玛是 膜磷脂在环氧酶系作用下形成的酸性脂类， 是主要的炎症 介质之一， 具有扩血管、 致热和致痛等作用。杭白菊挥发 油对大鼠小鼠的胸腺指数、 脾脏指数均无影响。实验结束 1 浙江医科大学生理学教研组 . 菊花制剂对冠脉作用的实验研究 【 J 。 浙江医 科大学学报， 1 97 9 ， 7( 4): 5 一 8 . 2 浙江菊花冠心片临床协作组. 菊花冠心片治疗冠心病 1 64例的 临床疗效观察 J . 浙江医科大学学报， 1 卯 8 ， 7( 4): 9 一 13. 3 杨学运. 中 药杭白 菊酚性部分的药理作用探讨 【 J. 浙江医科 大学学报， 1 98 9 ， 18 ( 6 ) : 2 8 2 . 4 c h . P 中国 药典 5 . v oll . 2 田 5 . ( 收稿日 期: 2 以 汤 一 1 2 一 12 ) 万方数据