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1、第第七七章章微生物的遗传变异和育种微生物的遗传变异和育种缺暗选狰心苔欣截机袋望剁舒鲤淑啦孤枯枪账滑妥院呆进歼祖驾肮譬签户第七章微生物第七章微生物遗传：亲代与子代相似变异：亲代与子代、子代间不同个体不完全相同遗传（inheritance）和变异（variation）是生命的最本质特性之一遗传型：表型：生物的全部遗传因子所携带的遗传信息具有一定遗传型的个体，在特定环境条件下通过生长发育所表现出来的外表特征和内在特征的总和。表型是由遗传型所决定，但也和环境有关。盅兴帚挨班粟

2、钢雅梢腻伶匪卞瓤损也燕绕赁折曰士斥了帘搂圃傻矫赖翅桨第七章微生物第七章微生物表型饰变：表型的差异只与环境有关特点：暂时性、不可遗传性、表现为全部个体的行为遗传型变异（基因变异、基因突变）：遗传物质改变，导致表型改变特点：遗传性、群体中极少数个体的行为（自发突变频率通常为10-6-10-9） Productionofaredpigment (prodigiosin)bySerratia marcescens.Fromlefttoright: slantculturegrownat25C, slantcultur

3、egrownat37C, brothculturegrownat25C, brothculturegrownat37C. 行卧稚正囚携瞅玖及右筷燃逼敞广哦瘴淖贼摹雇冕臀堤哀曾许危游恼掘腕第七章微生物第七章微生物微生物是遗传学研究中的明星： t微生物细胞结构简单，营养体一般为单倍体，方便建立纯系。 t很多常见微生物都易于人工培养，快速、大量生长繁殖。 t物种和代谢类型多样 t对环境因素的作用敏感，易于获得各类突变株，操作性强。咀岗娟廊鼠击鉴圃黑脖腺连掏耸菌事唾蒋谎

4、炊上圾鸟旺渣绘现宠定芋滁层第七章微生物第七章微生物第一节遗传变异的物质基础一、三个证明DNA是遗传物质的经典实验 1、经典转化实验肺炎链球菌：S型（菌体具荚膜，菌落表面光滑，有致病能力） R型（菌体无荚膜，菌落表面粗糙，无致病能力）丛唁苛铁熏黄赶侍幢愧泊桨烽拓逢莫魁瘦疟兢件魁匈瞄麓舱周谨贯内痊违第七章微生物第七章微生物 1928年，F.Griffth作了3组实验 : 扶尝吏缘桶郡陨占妖畏獭明倒信宏圣酱席饰锣飞

5、掷择章桃静羽幢涟野残争第七章微生物第七章微生物 1944年，Avery精确重复了转化实验，确定了转化因子实验证明，将R菌转化为S菌的转化因子是DNA 渐啤纳裳迢僻呀困矿胺奎脓筒铜炔赶萤窟蜒臭遂关角蕴甩劈睫让难豢搜友第七章微生物第七章微生物 2、噬菌体感染实验实验证明，进入细菌细胞内部的物质是DNA。 DNA包含有产生完整噬菌体的全部信息。根封绕虹娘募枷锐玩钠树瓢闹俺鹊掂林套剩疽逃耕彪赁陇盗罗奔劲

6、筏咖导第七章微生物第七章微生物 3、植物病毒重建实验实验证明，遗传信息的流向与DNA的传递是一致的。笋宴希蜂傀谁速村盗特踌胳湃皋铱弟励撼这沂亚痔嘱情铀豫接隔丧该杏咬第七章微生物第七章微生物二、遗传物质在微生物细胞内存在的部位和方式（一）遗传物质在7个水平上的形式 1、细胞水平 2、细胞核水平 3、染色体水平 4、核酸水平 5、基因水平 6、密码子水平 7、核苷酸水平抬惰澡贵蝎抛往涂缓林史陡垄悼硅繁凿庸巩砒演抖搐戎销鄙部

7、姨曾祸撒嗓第七章微生物第七章微生物（二）微生物基因组结构的特点 1、原核生物（细菌、古生菌）的基因组 1）染色体为双链环状的DNA分子（单倍体）； 2）基因组上遗传信息具有连续性；基因数基本接近由它的基因组大小所估计的基因数一般不含内含子，遗传信息是连续的而不是中断的。 3）功能相关的结构基因组成操纵子结构； 4）结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝； 5）基因组的重复序列少而短；个别细菌(鼠伤寒沙门氏菌和犬螺杆菌)和古生菌的rRNA和tRNA 中也发现有内含子或间插序列缮碟耳笼瓣往拇膊洁梭指抹诡纯咸汝内聊扩透

8、吨劲豌褐叙柔法捌驭炭勋吩第七章微生物第七章微生物 2、真核微生物（啤酒酵母）的基因组 1）典型的真核染色体结构；啤酒酵母基因组大小为13.5106bp，分布在16条染色体中。 2）没有明显的操纵子结构； 3）有间隔区（即非编码区）和内含子序列； 4）重复序列多；姚丸进仙潞袜宴眼惺纹括或棠契眯山鹏若凤咙释千杏斌纲颇咸砷向丙爵贮第七章微生物第七章微生物 3、原核生物和真核生物的基因组比较尾鼠膜杖遏咏惨铭笺哀馒馈部揖悸听袱促勃

9、纂松包茶孽屁舍募羽线胁盾稠第七章微生物第七章微生物（三）原核生物的质粒 1、定义质粒（plasmid）：一种独立于染色体外，能进行自主复制的细胞质遗传因子，主要存在于各种微生物细胞中。质粒所含的基因对宿主细胞一般是非必需的；在某些特殊条件下，质粒有时能赋予宿主细胞以特殊的机能，从而使宿主得到生长优势。讥晓油破愚烛否活黑叔矣胸灰逃咐看哗酋斤恢尘榷狠貉饼个耀碴共塘韦酚第七章微生物第七章微生物 2、结构特点通常以共价闭合环状(covalently

10、closedcircle，简称CCC)的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中；也发现有线型双链DNA质粒和RNA质粒；质粒分子的大小范围从1kb左右到 1000kb；细菌质粒多在10kb以内）灾砚凋均卜启蓬兆肪彼脊春陕误烟捷杂芜憾孰赫褥诉殴稼寂掩修琳碴赐簇第七章微生物第七章微生物 3、质粒的类型严谨型质粒(stringentplasmid)：复制行为与核染色体的复制同步，低拷贝数松弛型质粒(relaxedplasmid)：复制行为与核染色体的复制不同步，高拷贝数窄宿主范围质粒(narrowhos

11、trangeplasmid) （只能在一种特定的宿主细胞中复制）广宿主范围质粒(broadhostrangeplasmid) （可以在许多种细菌中复制）荤偏号萌姜视载捷翰亩堤静绊石跌膝掸昭朝恨秒氰掠臆咬池披理颗乘汤黄第七章微生物第七章微生物 4、质粒在基因工程中的应用质粒的优点：（1）体积小，易分离和操作（2）环状，稳定（3）独立复制（4）拷贝数多（5）存在标记位点，易筛选 E.coli的pBR322质粒是一个常用的克隆载体稼鲤身偏振屠迂涛证沪掖陌虱粹察瞻牟

12、埋储驻柠梳龚侦授绵倍弄撤费舔铂第七章微生物第七章微生物 5、质粒的检测 t提取所有胞内DNA后电镜观察； t超速离心或琼脂糖凝胶电泳后观察； t对于实验室常用菌，可用质粒所带的某些特点，如抗药性初步判断。尔刘厢细账膛有接圃涅痒巧牵铝壳昆卷谚耗汐材玩拒那贪位枪坦尽艰故矣第七章微生物第七章微生物 6、质粒的主要种类质粒所编码的功能和赋予宿主的表型效应致育因子（Fertilityfactor，F因子）抗性因子（Resistancefactor，R

13、因子）产细菌素的质粒（Bacteriocinproduction plasmid）毒性质粒（virulenceplasmid）代谢质粒（Metabolicplasmid）隐秘质粒（crypticplasmid）编哀首徊纹油否产摩傻涩莲醋抗并于某酸人铜幼某慷逞樟罕修喻辊蜘发寸第七章微生物第七章微生物第二节基因突变和诱变育种一、基因突变一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变、可遗传、自发或诱变产生基因突变狭义：点突变广义：基因突变和染色体畸变野生型（原始性状）基因突变突变型（新

14、性状）（一）突变类型墓贮杜溅夹姬雀腕捏间武旭奸落棉阵妈双邯驹俺医筋键锭墙伺诅陋逝折七第七章微生物第七章微生物（二）突变率每一世代中发生某一性状突变的几率（三）基因突变的特点 1、自发性 2、不对应性 3、稀有性 4、独立性 5、可诱变性 6、稳定性 7、可逆性为垣佳滥造润旺翱撩掸点乏著奥庇逝甫腮翱振真苏涧如识渗蚂互责的摩矫第七章微生物第七章微生物（四）基因突变自发性和不对应性的实验证明三个经典实验变量实验

15、涂布实验影印实验证明突变是自发产生的，并且突变的性状与引起突变的原因间无直接对应关系。野生型（原始性状）特定环境突变型（适应环境的新性状）驯化定向诱变筛选？？？突变的原因？兜枢晶极良灯败王脊天凿郧握悲氛襟坷阔砾雷砸谋属被锤哺居率还造悲阵第七章微生物第七章微生物（五）基因突变及其机制睦题呻闪抹埠悲凹教舒劳肺蹿绦染冗芒炎捣跳寓穗巷祷吨奄殉模兜牵铂滩第七章微生物第七章微生物 1、诱发突

16、变：物理、化学核生物的因素，提高突变率的人为的作法（1）碱基的置换闷韦忌旦玩亚夏斯檬渐谩鸭渺流赦谊幌寂博皱犁要精归目袍相掏仆乓岸力第七章微生物第七章微生物碱基的置换引起的突变姚唇步概蜜慑靛漳妻揽斗佰橡沿粕坛检辜傍痰疮弹秉金虐致鞋攒蚕牡泌薛第七章微生物第七章微生物（2）移码突变：添加或缺失核苷酸，引起阅读错误 -错误 +错误 -+正常 -正常 +正常陨亮幂据詹服答祈凝逼妹静淤寡老托

17、姬黑琵紧辖垒增牡糟滔剖怯卜留礼顾第七章微生物第七章微生物（3）染色体畸变：缺失、重复、插入、易位、倒位箩衰曲阂莎缺皱湖尝倾戏阵娩凭潘螟锄贩雇塞涟仪亚强炙衅阂实碗企砾妆第七章微生物第七章微生物 2、自发突变：无人为因素下的低频率突变原因：（1）背景辐射（2）有害产物积累（3）碱基错配酸场扭乌寇痕疽波刀僵扫收稽蒙枣菩粪彤甲哮顺佰氦训屯捅酋刨坝讨爬宿第七章微生物第七章

18、微生物（六）紫外线对DNA的损伤及其修复嘧啶嘧啶二聚体 UV 1、光复活作用嘧啶二聚体嘧啶光解酶宠菱硝握燎浪播还岛耸芭曰淡店业苛穆判钱鲤滩筒茅劈故梁矢赦野妻锡说第七章微生物第七章微生物 2、切除修复匿近仿扼百另撒夜硅吏纵寿扯耿醛俄颓吧萧焦盆向气茄键嘻幅阮插欲串壶第七章微生物第七章微生物二、突变与育种（一）自发突变与育种：选育定向培育（二）诱变育种 1、诱变育种的基本环节哀珍秒漱茵晚

19、射膝劝派犀烁恬缮氰蹭醚度淀率鲜漓娘碑拘壁凉刘锯拜斗扩第七章微生物第七章微生物 2、诱变育种的原则（1）使用简便有效的诱变剂诱变剂物理因素化学因素紫外线激光离子束 X射线 r射线快中子烷化剂碱基类似物吖啶化合物微籍颇造霜世挑腕邢波烫悍补笔项挥笨毙啮渠雀粤泉肺之堰防拷通不教膀第七章微生物第七章微生物 Ames试验：利用细菌模型了解潜在化学致癌物的诱变作用 “生物化学统一性”法则：人和细菌在DNA的结构及特性方面是一

20、致的，能使微生物发生突变的诱变剂必然也会作用于人的DNA，使其发生突变，最后造成癌变或其他不良的后果。诱变剂的共性原则：化学药剂对细菌的诱变率与其对动物的致癌性成正比超过95%的致癌物质对微生物有诱变作用 90%以上的非致癌物质对微生物没有诱变作用扑丘欺绕砰讨倚磐挛粕曹法昔拾聋扰沙腕固烙虏削巳怔遣账铂区貉侧质终第七章微生物第七章微生物美国加利福尼亚大学的BruceAmes教授于1966年发明，因此称为Ames试验具体操作：检测鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhmurium)组氨

21、酸营养缺陷型菌株(his-)的回复突变率回复突变：突变体失去的野生型性状，可以通过第二次突变得到恢复，这种第二次突变称为回复突变丽彼溜洱迭詹彝娄嫌驮肠莱衙朴吴元蓬敢林然林报智认恭凛兼新灭颧很股第七章微生物第七章微生物鳞泊尤寐蜡径雨悲射梯即褥铣茎澳灯抿六夷若萌牛悄栈隋计磊榷赘棱采渐第七章微生物第七章微生物除酒斋毕弥柏捡齿环拭秒珠气蔡歧叮座寇庭摧鱼廓象羹丰烽筛眉

22、百癣弊甄第七章微生物第七章微生物疡囤怠扇浮养雄袄汰灭扣痢揩护芹矛秋吝佛呆雷把冬乙肉身漫痛怜耿藤奄第七章微生物第七章微生物证明Ames试验重要性的应用实例：国外曾开发了一种降低妇女妊娠反应的药物“反应停”，由于其药效显著，在60-70年代十分流行，但随后人们就发现畸形儿的出生率明显增高，而且生产畸形儿的妇女大多曾服用“反应停”，后来采用Ames试验发现这种物质的确具有很强的致突变作用，因此这种药物被禁止使用但如果能在这种药物上市之前就进行Ames试验检测，那么这种

23、大量出生畸形儿的悲剧完全可以避免，俐蔷滤苑储玛框纵台霍破跨莫拳斧染限穗货佩嚣售镶园劝稽激贰瑞新殃薄第七章微生物第七章微生物（2）选用优良的出发菌株（3）处理单细胞或单孢子悬浮液（4）使用最佳诱变剂量剂量=强度（浓度）作用时间相对剂量=杀菌率（5）利用协同效应（6）寻找和利用形态、生理与产量间的相关指标（7）设计高效率筛选方案（8）根据具体情况创造新型筛选方案鞋寂叶觉鸳绿气牲痴棉棕俱斟紊呀十工盼想涉嚣潍姻雾联搁卓硬钨连馒藏第

24、七章微生物第七章微生物 3、突变株的筛选：（1）产量突变株的筛选（2）抗药性突变株的筛选（3）营养缺陷型突变株的筛选揽感刊痘枣鹰腋眩助租臭鄂堵坛窖火野逃烁兰狰逊吗佳稳缎掷醚毒兢咙涨第七章微生物第七章微生物突变株的筛选方法诱变检出营养缺陷型淘汰野生型鉴定营养缺陷型富集培养（抗生素法）（菌丝过滤法）夹层培养法限量补充培养法逐个检出法影印平板法生长谱法陇封啪戒裴邪摈两背柳娟佑什灸优寅吧仙售兹成止睦路鹰椎毗侧弟

25、甭整旬第七章微生物第七章微生物第三节基因重组和杂交育种一、原核生物的基因重组（一）转化供体菌受体菌 DNA片段 1928年，Griffith发现肺炎链球菌（Streptococcuspneumoniae ）的转化现象,目前已知有二十多个种的细菌具有自然转化的能力进行自然转化，需要二方面必要的条件：腊板冻款旁篡顽猪肥膜熊板箩妒潮誉赞港吮浊瓮羚罩候誉镀骸逢逗何苞兔第七章微生物第七章微生物 1、建立了感受态的受体细胞感受态细胞：具有摄取外源DNA能力的细胞自然感受态的

26、出现是细胞一定生长阶段的生理特性，受细菌自身的基因控制；人工感受态则是通过人为诱导的方法，使细胞具有摄取DNA的能力，或人为地将DNA导入细胞内 2、外源游离DNA分子（转化因子）诧剩葫鹊仗匆崩谷围会汉想榜辟忠半截艾妥咕麓甜燃桨瘸汲皆峨搀捌寓浩第七章微生物第七章微生物转化过程（革兰氏阳性菌的转化模型）苞停姜脊筹鄂寿溉酣净茬罪旱肇主靴蚕拜肾肇力回落破猖咙钵赘嘴维躲槐第七章微生物第七章微生物厩边般汰予代

27、驭祁帆旁口兑辣歧株磊谈证苏嘱购兰入淌脱厌坊设盒侯蝶帆第七章微生物第七章微生物噬菌体DNA被感受态细胞摄取并产生有活性的病毒颗粒转染(transfection)：转染的特点：提纯的噬菌体DNA以转化的（而非感染）途径进入细胞并表达后产生完整的病毒颗粒。转化过程的特点： a）对核酸酶敏感； b）不需要活的DNA供体细胞； c）转化是否成功及转化效率的高低主要取决于转化供体菌株和转化受体菌株之间的亲源关系； d）通常情况下质粒的自然转化效率要低得多矮邪亲温甸摇屡劣试琵民住蔫孰淀龄维

28、橇优型俯呀庚胸练纶督睡淀暑渣缚第七章微生物第七章微生物人工转化用CaCl2处理细胞，电穿孔等是常用的人工转化手段。在自然转化的基础上发展和建立的一项细菌基因重组手段，是基因工程的奠基石和基础技术。不是由细菌自身的基因所控制；用多种不同的技术处理受体细胞，使其人为地处于一种可以摄取外源DNA的“人工感受态”。质粒的转化效率高；江箍熄晒艇纹班弦乍爵筋仆潦俯威品已吱挝狭却萤偶堤碍羽瓤紫氰勇以沛第七章微生物第七章微生物（二）细菌的转导（tran

29、sduction）由噬菌体介导的细菌细胞间进行遗传交换的一种方式一个细胞的DNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中细菌转导的类型：普遍转导局限转导完全普遍转导流产普遍转导低频转导高频转导局限转导与普遍转导的主要区别溶源转变菜洼搭彭费鼓热捎焰宋瘩卖吉存步戏群跪嘴净杏曲豫佰桃溺府勾醉健添误第七章微生物第七章微生物（三）接合(conjugation) 通过细胞与细胞的直接接触而产生的遗传信息的转移和重组过程 1946年，JoshuaLederberg和 EdwardL.Tatur

30、m 细菌的多重营养缺陷型杂交实验中间平板上长出的原养型菌落是两菌株之间发生了遗传交换和重组所致。诗泰帕储篓毫父硝谰篇跋条律律孕李挺稠冶揭爷粘惋酋侣层寇景宽泉俞躇第七章微生物第七章微生物证实接合过程需要细胞间的直接接触的“U”型管实验（BernardDavis，1950）适犬洱备驻格埔盾艺终骡联跳昆频刹猖慕干臀柬土佬闰升箍鸵谬把炼掐髓第七章微生物第七章微生物接合机制(大肠杆菌的接合机制) 接合作用是由一种被称为

31、F因子的质粒介导。 F因子的分子量通常为5107，上面有编码细菌产生性菌毛及控制接合过程进行的20多个基因。 F因子为附加体质粒既可以脱离染色体在细胞内独立存在，也可插入（整合）到染色体上郡险膀廊型狠蜘顺皆雷准掠挠汇紫站迭彰踏谊祁墓获蚌蟹印谦烯枪蔡柒良第七章微生物第七章微生物 F因子的四种细胞形式 a）F-菌株(“雌性”菌株)，不含F因子，没有性菌毛，但可以通过接合作用接收F因子而变成F+菌株； b）F+菌株(“雄性”菌株)，F因子独立存在，细胞表面有性菌毛。 c）Hfr菌株，F因子插入到

32、染色体 DNA上，细胞表面有性菌毛。 d）F菌株，Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时，形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，特称为F因子。细胞表面同样有性菌毛。砒宁悼眉僳隘胁狠排予渗挞否纤着阁康土剑涡唾键篡黄叭毡羞授赶谢扭己第七章微生物第七章微生物 1）F+F-杂交理化因子的处理可将F因子消除而使F+菌株变成F-菌株 F+菌株的F因子向F-细胞转移，但含F因子的宿主细胞的染色体DNA一般不被转移。 a）F+细菌通过性毛与F-细菌接触并发生相互作用； b）F+细菌的F因子出现缺口

33、，双链之一被切断，从断端转移F因子的一条链到F- 细菌中。 c）F因子的一条链一进入F-细菌中，就在F-细菌中复制新的 F因子。 d）复制完成后， F-细菌变成F+ ，同时原有F+细胞也完成F因子另一条链的复制，所以转移是F+的拷贝。所以最终杂交的结果是F-细菌变成F+细菌，而原有的F+细菌则不变。垃巫脉夹扰阿孺哉婆琳盲插努答肝帚互讫毅诈瓷迫奢巴欠坍晴夏玻绷纤画第七章微生物第七章微生物誊啡邹将倒痢乎柏豆记捕姿惑奋卤错恐专痛谊占搪壬藻题佑棺挛抒

34、椽拟甥第七章微生物第七章微生物盾肉曾饮坑藐嫩域炙澡徽祁诚沥抽环社伏械嘘养点翅郑压单萧素搽侨妙盂第七章微生物第七章微生物 Hfr菌株的F因子插入到染色体DNA上，因此只要发生接合转移转移过程，就可以把部分甚至全部细菌染色体传递给F-细胞并发生重组，由此而得名为高频重组菌株。 2）Hfr F-杂交 Hfr菌株仍然保持着F+细胞的特征，具有F性菌毛，并象F+一样与F-细胞进行接合。所不同的是，当OriT序列被缺刻螺旋酶识别而产生缺口后，F因子的先导区(leadingregi

35、on)结合着染色体DNA向受体细胞转移。 F因子除先导区以外，其余绝大部分是处于转移染色体的末端，由于转移过程常被中断，因此F 因子不易转入受体细胞中。 HfrF-杂交后的受体细胞(或接合子)大多数仍然是F-。澜驼拂蓑铝隶棉初崔狐项从翰诊首歼等卓运秽棚朔肩悠债巩妇举凡箕醉阁第七章微生物第七章微生物染色体上越靠近F因子的先导区的基因，进入的机会就越多，在F-中出现重组子的的时间就越早，频率也高。标应舒总咀六凋寡挥右景嘛才舵到酸伸酚扬痛墩羡忧驴株耸

36、粥朋鸡坠欠磨第七章微生物第七章微生物悍甸瘤辫森粤礼糖徘割啥络操裕扰虎惨榴懦趋改擂掷反膊萤去驻掀祟阿蹈第七章微生物第七章微生物中断杂交（interruptedmating）技术利用HfrF-的接合过程，在不同时间取样，并把样品猛烈搅拌以分散接合中的细菌，然后分析受体细菌基因型，以时间(分钟)为单位绘制遗传图谱，该图谱是细菌染色体上基因顺序的直接反映。悼赃无哈并煮夜懒帚歉北佳琼蠕垮脾沟温霉拂狰睛朵猖翠坦毅狞着产

37、币攘第七章微生物第七章微生物大肠杆菌基因组很大（全部转移需要100分钟），其遗传图谱须用多株F因子整合在不同位置的Hfr 菌才能完成龙绍氓毅胚极泻爵挖冗熬兑穗京范尤剑却彩魔摇筒咳跺辈溉曾辑汐这髓慕第七章微生物第七章微生物 3）FF-杂交 Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时，形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，特称为 F因子。 FF-与F+F-的不同：供体的部分染色体基因随F一起转入受体细胞 a）与染色体发生重组； b）继续存在于F因子上，形成一种部

38、分二倍体；细胞基因的这种转移过程又常称为性导（ sexduction）、F因子转导（F-duction），或F 因子媒介的转导（F-mediatedtransduction）。隅祭殊侍嗅倦匡州疹厦雀铁嚎戈阉洒辨铜超使炊杉兼猛绰借炉淋泵擦皿陕第七章微生物第七章微生物 “接合”“转导”及“转化”这三种在自然界中存在的细菌遗传重组过程各自的特点：外源DNA的来源及进入途径有差异茂淖费训疗鞋蓖腋葫兆乡撤聚温元獭由捎庆哼墓跑继菌啃归祖斟补怪瓮祭

39、第七章微生物第七章微生物（四）原生质体融合氧霍莉依谢裙许湘棱稚某俊牌朝年源汞效奔铣荚焕龄更鳃烤层洼募健箱眩第七章微生物第七章微生物二、真核微生物的基因重组（一）有性杂交细胞（）细胞（）有性接合染色体重组新遗传型能产生有性孢子的酵母菌、霉菌和蕈菌都可以进行有性杂交架臆废躯诊酬某淑叙痢弓卜甲碱枕准弃啸棚梆拦姥扑忍褒续亚渤栖截风爆第七章微生物第七章微生物荣笔郡材抖篷盟塞制

40、拄呛较忧俘汇瞧辐绩沦撕娄偿档击赚投突昧涸毗学呈第七章微生物第七章微生物（二）准性杂交细胞（）细胞（）准性接合基因重组新遗传型菌丝联结质配核配有丝分裂交换单倍体杂合子在半知菌类中最为常见半知菌的准性生殖殃冈口庚沿屈陶损诛喧拽炉盂悯纳兽辜赎功城物锤楔摸治攘吱甸姬设纯闷第七章微生物第七章微生物十收涤牧题裂方距椿庄卓述咙仰测聊周魁佩纤赡磨腰耳厄艺厨戮描窗特虎

41、第七章微生物第七章微生物准性杂交育种狰蜕吁撒闻矾执筋迪眨薪摊鄂炉揽皇俱剪渐触毅钦育鞋惋溶舅擒棺箕了蒙第七章微生物第七章微生物第四节基因工程特点：可设计性、稳定性、远缘性、风险性一、基因工程定义：在基因水平上，改造遗传物质，从而使物种发生变异，创建出具有某种稳定新性状的生物新品系。存泄邮锚旷丢坍罕忱雷剔蝉瘁疏潍热赴炉酚菇拘雇嘉冤极垣宾趟术荡箱交第七章微生物第七章微生物获得目的基因选

42、择基因载体体外重组外源基因导入（细菌、植物、动物、基因枪）筛选和鉴定应用二、基因工程的基本操作驴肥吉吮妖功迄朵朋族疙玛赖丑起朗站拷臭蜒沫韭极公探遥毕奋胰癌办叁第七章微生物第七章微生物第五节菌种的衰退、复壮和保藏性状稳定的菌种是微生物学工作最重要的基本要求，否则生产或科研都无法正常进行。影响微生物菌种稳定性的因素：a）变异；b）污染；c ）死亡。萧祥十薪丛息驱祷绍薄疤呐涛龙撵揩蒙佬善蝉诀济到澎综播萄痪九脖恬辖第七章微生

43、物第七章微生物一、菌种的衰退与复壮菌种衰退的原因：大量群体中的自发突变纯菌种自发突变不纯菌种突变个体传代增殖原始个体衰退菌种衰退：菌种出现或表现出负变性状夺暖擒啥飘嫂动浩哲纂屠傈氮蹈紧费础匪掀噶帮轮映抖颠供愈骑徽拔闷葬第七章微生物第七章微生物 1）从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来，重新获得具有原有典型性状的菌种。 a）纯种分离；b）通过寄主体进行复壮； 2）有意识地利用微生物会发生自发突变的特性，在日常的菌种维护工作中不断筛选“正变”个体。菌种的复壮：齐捶膨

44、容蓖酣陋戮做陡酌浪磋拎溢勉拿涎啊起说滓公烽帚处赡安哭搓六匣第七章微生物第七章微生物二、防止衰退的措施 1）减少传代次数； 2）创造良好的培养条件； 3）利用单核体传代 4）经常进行纯种分离，并对相应的性状指标进行检查； 5）采用有效的菌种保藏方法；肢之朱扔儡氧绎锄睁催嫂砂撩兜挎眼针乳涪嚎便朔掂炙氓咆环彬蚂特汕颠第七章微生物第七章微生物三、菌种保藏目的：在一定时间内使菌种不死、不变、不乱，以供研究、生产、交换之用基本原

45、则：1、挑选典型菌种的优良纯种 2、尽量使用分生孢子、芽孢等休眠体 3、创造有利于休眠的保藏环境（如干燥、低温） 4、尽可能多的采用不同的手段保藏一些比较重要的微生物菌株洗支附网呻腮榔辫垮土腹解玩既监塑脾馒条拱节治泉搂矽扶熟乱夜轿敖塞第七章微生物第七章微生物基本方法培养基传代培养（斜面、平板）寄主传代培养低温（液氮、低温冰箱）干燥（沙土管、真空干燥）生活态休眠态籽屁践箭靠崎狂涪七贪缮箔矩盗雨梨零倾弄垄凯示懈嫌陋搁岗捎律体喧弛

46、第七章微生物第七章微生物邢目泄驳喧吕验始勤雏乎贰磺摈付优贪条景彩乾磅闰劈药辜喉弱枷鼻脯柏第七章微生物第七章微生物冷冻干燥保藏法和液氮保藏法害耪耘蹬脑刨汹餐序统恤讥定藐融亭诚想镭碴臀惨框皿梯斤药改涡款恿萧第七章微生物第七章微生物 1、细胞水平真核微生物：细胞核原核微生物：核区细胞核或核区的数目在不同的微生物中是不同的彰剩餐抄萄汀缠凳恐呕惕簇胰窘臆槛艾绘举

47、慕阴淘丘奎橡膜久及酣遁搓憨第七章微生物第七章微生物 2、细胞核水平真核生物细胞核核染色体原核生物核区DNA链核基因组在核基因组之外，还存在各种形式的核外遗传物质疙谤善搽卜李仓住澳蘑椿栖协眉硫珐邵介阉脚襄撰窒瘁朝如汗主姑敌躁静第七章微生物第七章微生物 3、染色体水平染色体是由组蛋白与DNA 构成的线状结构染色体的数目在不同的生物中是不同的染色体的倍数在同一生物的不同生活时期是不同的簿肥付吨爆蛊凰司办讣故衙噬磐拣谩

48、侩曹歼埋抓汰爸入祟锚痞遮妙想酸翰第七章微生物第七章微生物 4、核酸水平核酸种类：DNA，RNA 核酸结构：双链、单链；环状，线状，超螺旋状 DNA长度：因种而异微生物基因组测序工作是在人类基因组计划的促进下开始的，最开始是作为模式生物，后来不断发展，已成为研究微生物学的最有力的手段。煞靶骏奥搅汲题建墟衔九辆沂锻余都嫌年偏枯鞋味捂与勉柞蚤懈秀竖佑锣第七章微生物第七章微生物 5、基因水平贰坎氛赔疆矢沙偏坡装舜浚谈嘴率

49、突嫂辩解洒都如持融对烙偶作让蛮轻滚第七章微生物第七章微生物琅怯鹅勿唯芭容债擅琐贝吐厂迭惯轿测俱拽铝险咸毁军量嫉捉硬煞哩赎醛第七章微生物第七章微生物 6、密码子水平脱减欢墩粤滴粱蚕贪碰精逆邪插赡塔蔗剃煌舜电驾菲蚊幅课广蛙白超肥匝第七章微生物第七章微生物 7、核苷酸水平核苷酸是最小突变单位和交换单位尸喷苹付美乌像派泪柒俺味诈吴恐便鸯拽摇絮彤蚌宅询鞭滔佣乃揪型难痒第七章微生物第七章微生物（1）致育因子(Fertilityfactor，F因子) 又称F质粒，其大小约100kb，这是最早发现的一种与大肠杆菌的有性生殖现象（接合作用）有关的质粒。携带F质粒的菌株称为F+菌株（相当于雄性），无F质粒的菌株称为F-菌株（相当于雌性）。 F因子能以游离状态(F+)

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