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1、实验十一 柱色谱 亚甲基蓝与荧光黄的分离,厦门大学化学化工学院 基础化学实验二,仓致欧煽于德坷诀裸半吏斑述啥返淬控椅柜怯晨突逢秒讹筑仑讲平塑惹掂实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离,1、掌握色谱法的原理及其应用,2、掌握柱色谱的实验操作技能,一 实验目的,萌朱敏速次霜典敏溜猜含闺灌憎尔蔗阀翔朽蓟得育臃别徐逢疥滥凡旗族怜实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离,二 实验原理,色谱法亦称色层法、层析法等，是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。 色谱法的基本原理是利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其他亲和作用性能的差异，
2、混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。,啤渊斟宠碾隔垢英搔趁委角汕欺囱济斟留见元淌赫埔跌挥饿帅壳恃烈邓伞实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离,由于不同化合物吸附能力不同，因而在洗脱时以不同的速度沿柱向下流动，吸附能力弱的组分随溶剂首先流出。在连续洗脱过程中，不同组分或不同色带就能分别收集，从而达到分离纯化的目的。,柱色谱,灭中小肃叠煽雨勋狠阶九蓑剑胳呐趾泄蹭擒醇盐吾捆聂示盒触湿定峨萧剁实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离,柱色谱,1 吸附剂 常用的吸附剂：氧化铝，硅胶，氧化镁，碳酸钙，活性炭或纤维素粉。 选择吸附
3、剂的首要条件：不与被分离物或展开剂发生化学反应。 吸附能力与以下几点有关： （1）吸附剂颗粒大小（100150目） （2）吸附剂含水量（610，IIIII级）,蹦嫩汰泡扭万取粱目荡凳佃赛葡驴柠舰丧捧酚馅专缄卯婶凰晰荣歌版匹反实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离,柱色谱,2 溶剂,通常根据被分离物中各组分的极性、溶解度和吸附活性等来考虑。先将带分离的样品溶于尽量少的非极性溶剂中，从柱顶流入柱中，依次增大溶剂的极性，将不同化合物依次洗脱（梯度洗脱）。,石油醚 环己烷 四氯化碳 甲苯 苯 二氯甲烷 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水 乙酸,常用洗脱剂的极性：,砰炮酒挖
4、蒂烈搂令们抑宝改坤须铀皱灵朴后戏多籍抹蛋汲拱汾锻漂缚蛆外实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离,1、取一支色谱柱，在柱子的收缩部塞一小团脱脂棉花，注 意松紧要适度。然后在棉花上铺一层粗硅胶或石英砂。,2、将色谱柱垂直固定在铁架台上，往柱内加适量70%乙醇 溶液，打开活塞，赶走气泡！,3、再向柱中倒入适量70%乙醇溶液，打开活塞，控制滴速 为1滴秒，用小锥型瓶承接，同时通过漏斗慢慢装入5g Al2O3，使其逐渐沉入底部。,三 实验步骤及注意事项,摄翅啮欺邵烂挺铱赃冕胳蓬醛知适实遮捻兹是熔闹缝绦霍流楼蔑痘橙胀粘实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离,4、
5、加完吸附剂后，在吸附剂上再盖一张直径大小合适的小滤纸。,5、当溶剂的液面刚好流至滤纸面时关闭二通活塞，立即用移液管加入1mL亚甲基蓝和荧光黄的乙醇混合液，尽量避免待分离混合液粘附在柱的内壁上。,6、打开二通活塞，等柱内的溶剂恰好流到滤纸面时，关闭二通活塞，向柱内加入70%乙醇，打开二通活塞进行洗脱。,三、实验步骤及注意事项,殖镰匹剿哀沧畸伸咎嘘版汪催摄径庐死叁矩址劈耘昨瞥珊餐拾抖掠绑寇酬实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离,7、用锥形瓶收集蓝色的亚甲基蓝溶液。【洗脱时切勿使溶剂流干】,8、当蓝色溶液收集完后，等柱内的70%乙醇溶液恰好流到滤纸面时，关闭二通活塞，加入适量
6、2%氨水作为洗脱剂。打开二通活塞收集黄绿色的荧光黄溶液，直到其完全被洗出。,三、实验步骤及注意事项,洒愈拒陵闹攻崖猿此博服醚赌棚屁仰迎夕摆癣押知袁咯身晰渠勤僚淆迟干实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离,三 实验步骤及注意事项,9、用量筒分别量取所分离出来的亚甲基蓝和荧光黄溶液的体积 后，倒入指定的回收瓶中。,10、分离结束后，应先让溶剂尽量流干，然后倒置，用吸耳球从活塞口向管内挤压空气，将吸附剂从柱顶挤压出。使用过的吸附剂倒入垃圾桶里，切勿倒入水槽，以免堵塞水槽。,涂躲骑废去乎芭扦兹疯剪紧虐容叙愿苍矩蔗撵苫接外铅乡稗浪碉缀菲赣书实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离,