F-7000荧光分光光度计使用操作步骤.ppt

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1、F-7000荧光分光光度计使用操作步骤,1、开机: (1)开启计算机。 (2)开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮(POWER)。同时,观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来,都显示绿色。,2、计算机进入Windows XP视窗后,打开运行软件(如图1)。,(1)双击桌面图标 (FL Solution 2.1 for F-7000)。主机自行初始化,扫描界面自动进入。 (2)初始化结束后,须预热15-20分钟,按界面提示选择操作方式。,图1 FL Solution 2.1扫描界面,3、测试模式的选择:波长扫描(wavelength scan),(1) 点

2、击扫描界面右侧“Method” 。 (2) 在“General”选项中的“Measurement”选择“wavelength scan”测量模式,如图2。,图2 Method-“General”选项的界面,(3)在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数,如图3。,图3 Method- “Instrument”选项设置界面,主要参数选项包括: 选择扫描模式“Scan Mode”:Emission/Excitation/Synchronous(发射光谱、激发光谱和同步荧光)。 选择数据模式“Data Mode”: Fluorescence/Phosphprescence/Lumine

3、scence(荧光测量、磷光测量、化学发光)。 设定波长扫描范围。,扫描荧光激发光谱(Excitation):需设定激发光的起始/终止波长(EX Start/End WL)和荧光发射波长(EM WL); 扫描荧光发射光谱(Emission):需设定发射光的起始/终止波长(EM Start/End WL)和荧光激发波长(EX WL); 扫描同步荧光(Synchronous):需设定激发光的起始/终止波长(EX Start/End WL)和荧光发射波长(EM WL)。 !Attention:激发光终止与起始波长差不小于10nm。,选择扫描速度“Scan Speed”(通常选240nm/min)。

4、选择激发/发射狭缝(EX/EM Slit)。 选择光电倍增管负高压“PMT Voltage”(一般选700V)。 选择仪器响应时间“Response”(一般选Auto)。 选择光闸控制“Shutter Control”打,以使仪器在光谱扫描时自动开启,而其他时间关闭。 选择“Report”设定输出数据信息、仪器采集数据的步长(通常选0.2nm)及输出数据的起始和终止波长(Data Start/End)。,!Attention:Data Start/End需与“Instrument”选项中设置一致,否则所得到的数据点会逐渐减少,而无法作图。 (4)参数设置好后,点击“确定”。,4、设置文件存储路

5、径,(1)点击扫描界面右侧“Sample” ,如图4。,图4 Sample选项的界面,(2)样品命名“Sample name”。 (3)选中“Auto File”, 打。可以自动保存原始文件和TXT格式文本文档数据。 (4)参数设置好后,点击“OK”。,5、扫描测试,(1)打开盖子,放入待测样品后,盖上盖子。(请勿用力)。 (2)点击扫描界面右侧“Measure” (或快捷键F4),窗口在线出现扫描谱图。,6、数据处理,(1)选中自动弹出的数据窗口,如图5。 (2)选择“Trace” ,进行读数并寻峰等操作。 (3)上传数据。,图5 扫描谱图窗口,3、关机顺序(逆开机顺序实施操作):,(1)关

6、闭运行软件FL Solution 2.1 for F-7000,弹出窗口,如图6。 (2)选中“Close the lamp,then close the monitor windows?”,打“”。 (3)点击“Yes”。窗口自动关闭。同时,观察主机正面面板右侧的Xe LAMP指示灯暗下来,而RUN指示灯仍显示绿色。,图6 关闭运行软件,(2)约十分钟后,关闭仪器主机电源,即按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮(POWER)。(目的是仅让风扇工作,使Xe灯室散热)。 (3)关闭计算机。,寻找激发波长的方法,测试前,激发波长未知,可以按照以下步骤寻找激发波长。,1. 首先在发射光谱设置中输入一个激发光波长数值,如300 nm,设置发射光谱范围,通常起始值大于激发波长,小于激发波长的二倍,得到一个发射光谱,得到一个或几个发射波长的峰值 2. 重新在激发光谱中设置,输入步骤一中得到的发射波长,设置激发光谱范围,通常起始值大于发射波长的一半,小于发射波长,得到激发波长的峰值 3. 按照步骤二的过程,将几个发射波长都输入,得到几个激发波长 4. 重复步骤一的过程,输入步骤二,三中得到的激发波长,观察发射光谱的峰形,确定发射光谱。,

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