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1、生物工程1、（海淀一模）5G418是一种抗生素，可通过影响核糖体的功能而阻断蛋白质合成，而neo基因的表达产物可使G418失效。下表为G418对不同细胞致死时的最低用量，以下分析不正确的是 （ ）细胞名称G418浓度（g/ml）中国仓鼠卵巢细胞700800植物细胞10酵母菌125500A不同真核细胞对G418的敏感度不同BG418可有效抑制植物愈伤组织的生长CG418不干扰neo基因的转录和翻译Dneo基因可作为基因工程的标记基因2、（朝阳一模）1下列各项与直接培养微生物无关的是A制作果醋需将环境温度保持在3035 B将土壤稀释液涂布于选择培养基上培养 C将样品显色液与标准显色液比较，测定样品
2、中亚硝酸盐含量 D制作腐乳时，需先将豆腐在适宜温度、湿度条件下放置5天3、（丰台一模）2下列过程不属于克隆的是 A单个大肠杆菌形成单菌落 B壁虎断尾后长出新尾巴CPCR扩增抗除草剂基因 D利用柳树枝条繁殖植株4、（海淀二模）1制作果酒、果醋和泡菜三个实验的共同点是 （ ） A.菌种为异养原核生物 B.将原料灭菌后再发酵 C.保证无氧环境下发酵 D.发酵液最终呈现酸性5、（朝阳二模）5关于生物工程和技术的说法正确是A从某生物cDNA文库中获取的目的基因，不含基因中的启动子B单倍体育种需要细胞分裂素、生长素、秋水仙素等激素的参与C动物细胞培养过程中，培养箱中需含5%的CO2刺激细胞呼吸D为统计某水
3、样中活菌的数目，可采用平板划线法进行接种6、（石景山一模）5. 现有一种能生产甲硫氨酸的M菌，但产量很低，而且当培养液中甲硫氨酸的含量达到最大值后，继续培养，甲硫氨酸含量会迅速下降。这是由于甲硫氨酸的积累反过来抑制了其合成。用紫外线照射可选育得到能抗甲硫氨酸抑制的高产新菌株。下列有关选育过程的表述，不正确的是A这种新菌株的选育方法属于用物理因素诱导的诱变育种BM菌培养液中甲硫氨酸的含量达到最大值后又不断减少是反馈调节的结果C用紫外线照射M菌时，还应在其培养基中添加甲硫氨酸D该选育过程中采用的培养基是液体培养基7、（丰台二模）4棉铃虫导致棉花减产，苏云金芽孢杆菌产生的某种毒蛋白能干扰棉铃虫的消化
4、功能。研究人员将该毒蛋白基因导入棉花受精卵中，成功培育出抗虫棉。下列叙述正确的是A用同种限制酶处理毒蛋白基因和棉铃虫的DNA分子B广泛栽种抗虫棉会使棉铃虫抗毒蛋白基因频率增加C棉铃虫和苏云金芽孢杆菌为捕食关系D培育抗虫棉的育种原理是染色体变异8、（丰台二模）5下列有关实验的叙述不正确的是A用于筛选杂交瘤细胞的培养基属于鉴别培养基B诱导外植体脱分化需要用含有蔗糖的培养基避光培养C平板划线法和稀释涂布平板法均可用于分离纯化菌种D用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低9、（顺义二模）5下列高中生物学实验中必须使用无菌水的是A将大肠杆菌培养液进行系列梯度稀释B破碎鸡血细胞获得含有D NA的滤
5、液 C配制培养大肠杆菌的固体培养基 D冲洗葡萄榨取制作果酒的葡萄汁4.1基因工程1. （昌平30，节选）2012年世界草霉大会在昌平举行，展示了来自世界各地的多种草莓研究和栽培技术。请分析回答下列问题：（3）会展中有一份发明专利，利用转基因草霉作为生物反应器生产人胰岛素。研究人员根据已知的胰岛素基因序列，采用_方法获得了胰岛素基因。对获得的人胰岛素基因进行修饰，使合成的胰岛素滞留在内质网内，其目的是不被_的酶降解。这种修饰的胰岛素基因通常用_法转入草莓细胞中，使其随草莓细胞基因组进行表达。这项专利所依据的遗传学原理主要是_。2. （朝阳28）金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病。科学家在某
6、种植物中找到了抗枯萎病的基因，通过下图所示的方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品种。相关叙述正确的是A图中在基因工程中依次叫做基因表达载体、目的基因B形成的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶C由培育至过程中，依次经历了脱分化、再分化过程D在幼苗中检测到抗枯萎病基因标志着成功培育新品种3. （朝阳47，节选）下图是利用现代生物技术改良草莓品系的过程：（2）欲获得抗虫草莓可从蛋白酶抑制剂基因、生长素诱导基因中选择 作为目的基因，要鉴定草莓的抗虫性，从个体水平上可采用 实验。4. （丰台44）下列叙述符合基因工程概念的是AB淋巴细胞与瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B将
7、人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C用紫外线照射青霉菌使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后，其DNA整合到细菌DNA上5. （丰台50）下图表示利用PCR技术扩增目的基因的部分过程，其原理与细胞内DNA复制类似。下列叙述错误的是A从理论上推测，第二轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4B在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段C引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因D耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3端6. （丰台60）chlL基因是野生型蓝藻中控制叶绿素合成的基因，
8、科学家为研究其功能，需要构建缺失chlL基因的突变型蓝藻，实验过程如下图所示。图中细菌质粒pUC118带有氨苄青霉素的抗性基因（ampR）；其上的lacZ基因编码的蛋白质可以让细菌在含有半乳糖的培养基上形成蓝色菌落，该基因被切断时菌落呈白色。细菌质粒pRL-425带有红霉素的抗性基因（Er）。请回答：（1）科学家首先需要通过_扩增出大量的野生型蓝藻的chlL基因，将其导入pUC118中获得重组质粒1。在含有半乳糖的平板上，菌落呈_色的是成功导入重组质粒1的细菌形成的。（2）将野生型蓝藻和突变型蓝藻分别放在含有红霉素的液体培养基中培养，野生型蓝藻会_；而在不含红霉素的液体培养基中分别培养时，出现
9、_的现象，才能说明突变型蓝藻chlL基因的部分片段缺失不影响其正常的生长繁殖。（3）已知蓝藻叶绿素的合成有两条途径，依赖光的合成和不依赖光的合成，分别提取在光下和黑暗环境中培养的野生型和突变型蓝藻的叶绿素，其含量见下表：项目蓝藻叶绿素含量/g(OD730-1)光下培养黑暗中培养野生型4.223.34突变型4.220.08由上表数据可以得出的结论是_。7. （石景山28）下列关于基因工程的叙述，不正确的是A目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物B基因工程可定向改变生物的遗传性状C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的
10、表达8. （石景山46，节选）下图是对有机废弃物进行处理的一种方案，请回答问题：（5）若利用DNA重组技术将降解塑料的基因导入某些土壤微生物(如：根瘤菌)中，则土壤中的塑料有望得到较快降解。获得目的基因后可采用_技术进行扩增。构建基因表达载体时用到的酶有_。不同物种的基因能拼接在一起，是因为它们 。9. （通州37）下列有关基因工程的叙述中，不正确的是A构建基因表达载体是基因工程的核心B通过基因工程育种可以定向地改变生物的性状C当目的基因导入受体细胞后，便可以稳定维持和表达其遗传特性了D将目的基因转入大肠杆菌细胞首先要用钙离子处理细胞，使之成为感受态细胞10. （通州48，节选）马铃薯是种植广
11、泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答： （3）若要通过转基因技术获得抗病毒的马铃薯植株，采用最多的方法是将病毒复制酶基因插入到农杆菌中Ti质粒的T-DNA上，构建出 后，将其导入马铃薯受体细胞，筛选出成功转化的马铃薯细胞后，再通过 技术形成完整植株。11. （西城36）我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答。重组Ti质粒铁结合蛋白基因潮霉素抗性基因含重组质粒的农杆菌导入农杆菌MS培养基开花后水稻未成熟的
12、胚培养基2筛选培养愈伤组织转移加入培养基愈伤组织转移培养基3转基因水稻（T0代）（1）铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用 法获得此目的基因或用 扩增目的基因。（2）构建重组Ti质粒时，通常要用 分别切割 。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用 处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得 ；培养基3与培养基2的区别是 。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻 。（4）为研究外源基因的遗传方式，将T0代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的潮霉素抗性。在检测的多数T1代株
13、系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为31，此结果说明外源基因的遗传符合 。有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是 。4.2克隆技术病人取出分离移植分离囊胚发育脏器组织细胞神经细胞等脏器组织干细胞神经组织干细胞等胚胎干细胞应用治疗健康细胞细胞核去核卵细胞重组细胞1. （朝阳29）治疗性克隆有希望最终解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应。下图表示治疗性克隆的过程，下列说法正确的是 A上述过程实现了动物细胞的全能性 B上述过程利用了动物细胞培养技术和动物细胞融合技术 C胚胎干细胞的不断增殖和分化的潜能保证过程的进行D、过
14、程不进行DNA复制和蛋白质合成2. （朝阳30）下列有关细胞工程的叙述，正确的是A. 植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备过程中都需要对融合后的细胞进行筛选B. 植物体细胞杂交就是指不同种植物原生质体融合的过程，原理是膜的流动性C. 植物细胞在组织培养过程中染色体数目始终保持不变D. 经核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状3. （朝阳39）下列各项培育植物新品种的过程中，不经过愈伤组织阶段的是A通过植物体细胞杂交培育白菜甘蓝B通过多倍体育种培育无子西瓜C通过单倍体育种培育优质小麦D通过基因工程培育转基因抗虫水稻 4.（朝阳47，节选）下图是利用现代生物技术改良草莓品系的过程：（1）将野生绿
15、草莓的叶片离体组织培养成四倍试管苗的过程，体现了植物细胞的 性，此过程中秋水仙素的作用机理是 。（3）过程常规方法采用杂交育种，还可先用花药离体培养分别获得抗虫草莓和凤梨草莓的 ，再用 技术获得同时具凤梨风味和抗虫特性的六倍体草莓，该技术常用的酶有 。5. （东城29）右图表示一定条件下将胡萝卜的离体组织培育形成试管苗的过程。有关叙述不正确的是A需在无菌条件下将离体组织接种到培养基中B图中过程分别表示脱分化和再分化C利用此过程获得的试管苗均为纯合子D此实验说明分化的植物细胞仍具有全部的遗传信息6. （东城30）下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是A图中实验小鼠注射的甲是
16、能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙C用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长D丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁40%30%20%10%01 2细胞出芽率细胞分裂率（注：“细胞出芽”表明愈伤组织中部分细胞再分化）7. （丰台43）为研究培养基成分对马铃薯叶肉原生质体培养的影响，科学家完成下表所示的实验，培养条件相同且适宜原生质体存活，实验结果如右图所示，下列分析错误的是组别培养基培养天数1MS培养基（含蔗糖、有机酸、无机盐、琼脂等）7天2纤维二糖MS培养基（同上）7天A纤维
17、二糖有助于愈伤组织形成B纤维二糖降低了细胞分化能力C实验中所用的马铃薯叶肉原生质体需要严格灭菌D培养基还需要添加适当比例的生长素和细胞分裂素8. （丰台45）利用小鼠制备单克隆抗体时，不需要进行的是 A从免疫小鼠的脾脏获得B细胞 B将B细胞与杂交瘤细胞融合 C用选择培养基筛选杂交瘤细胞 D从培养液或小鼠腹水中提取单抗9. （石景山39）下列关于利用细胞工程技术制备单克隆抗体的叙述，不正确的是A给小鼠注射抗原，是为了获得能产生相应抗体的B细胞B骨髓瘤细胞与B细胞混合培养，是为了获得融合细胞C杂交瘤细胞进行体外培养，是为了获得单克隆抗体D杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎10
18、. （通州38）下列对“克隆”广义概念认识的叙述，正确的是A淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞属于有性生殖范畴，不属于克隆B由单一个细菌长成菌落，属于细胞水平克隆C胰岛素基因导入大肠杆菌细胞后大量扩增，不属于克隆范畴D“克隆”就是指从一个亲代个体，通过无性繁殖生产出来的一群遗传特性相同的个体11. （通州39）“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的，培育过程不涉及A同源染色体分离 B基因的选择性表达 C制备原生质体 D形成愈伤组织12. （通州48，节选）马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答： （1）马铃薯茎尖病
19、毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，诱导离体细胞经过 完成组织培养过程，获得脱毒苗。为监控脱毒苗的质量，可采用 的方法检测病毒的基因，也可采用 的方法检测病毒的蛋白质。（2）研究人员研究了茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响，实验结果如右图。实验结果表明：茎尖越小， ，因此马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为 。13. （西城16）下列关于动物细胞培养的叙述不正确的是A动物细胞培养技术的原理是细胞的全能性B传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞C癌细胞在培养瓶中不会出现接触抑制现象 D动物细胞培养一般需要使用CO2培养箱14. （西城18）通过植物体细胞杂交可以获得“
20、烟草一菠菜”一种新型的烟草品种。下图为培育杂 种植株过程的示意图，下列操作不是必须的是 烟草体细胞原生质体A菠菜体细胞原生质体B正在融合的原生质体杂种细胞愈伤组织烟草菠菜幼苗A在融合之前除去两种细胞的细胞壁 B原生质体先进行脱分化处理再融合C原生质体融合后筛选杂种细胞继续培养 D诱导杂种细胞形成愈伤组织再分化成植株15. （西城19）某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家以该小鼠为实验材料，利用单克隆抗体技术，获得了抗某种病原体的高纯度单克隆抗体。下列叙述不正确的是A被多种病原体感染过的小鼠体内会产生多种效应B细胞B经细胞融合后形成的单个杂交瘤细胞可分泌多种特异性抗体C用“抗原抗体检测法”
21、可筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞D单克隆抗体的制备过程中使用了细胞培养和细胞融合技术17.生物技术实践（重庆卷）5.某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材消毒愈伤组织培养出芽生根移栽”。下列有关叙述，错误的是A消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害B在愈伤组织培培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞C出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控D生根时，培养基通常应含 -萘乙酸等生长素类调节剂【答案】B【解析】消毒剂的使用既要杀死表面微生物，有防止伤害组织细胞，影响组织培养，A项正确；植物细胞融合是指经纤维素酶和果胶酶处理后得到的原生质体
22、的诱导融合，带有细胞壁的愈伤组织细胞不能诱导融合形成染色体加倍的细胞，B 项错误；出芽和生根都是细胞再分化的结果，其实质是基因的选择性表达，C 项正确；-萘乙酸为生长素类似物，可诱导愈伤组织生根，D 项正确。【试题评价】本题考查植物组织培养相关知识和考生的理解能力，涉及外植体的消毒、植物体细胞杂交、细胞分化及植物生长调节剂对组织培养的影响等内容，较易得分。（江苏生物卷）6下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是A.可用包埋法制备固定化酵母细胞B.反应产物对固定化酶的活性没有影响C.葡萄糖异构酶固定前后专一性不同D.固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应【答案】A【解析】固定化技术包括包
23、埋法、物理吸附法和化学结合法（交联法），由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法， A正确；某些反应产物可能与酶结合，致使酶的结构产生变化，从而改变酶的催化活性，B错误；固定化酶实质上是将相应酶固定在不溶于水的载体上，实现酶的反复利用，并提高酶稳定性，酶的各项特性（如高效性、专一性和作用条件的温和性）依然保持，C错误；固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用，但如果反应底物是大分子物质，则难以自由通过细胞膜，从而限制固定化细胞的催化反应，D错误。【试题评价】此题考查固定化酶和固定化细胞的相关知识，难度不大。（江苏生物卷）11某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。
24、为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是A.利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗B.采用花粉粒组织培养获得单倍体苗C.采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上D.采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养【答案】B【解析】茎段扦插、幼芽嫁接、植物组织培养都是无性繁殖，可以大量快速得到与原有性状相同的个体，A、C、D均可选用；采用花粉粒离体培养可获得单倍体幼苗，但由于花粉粒为雄配子，发育来的单倍体植株会发生性状分离，不能保持亲代的优良性状，B错误。【试题评价】此题考查无性繁殖及单倍体植株的特点，难度适中。（江苏生物卷）14某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下
25、列相关叙述正确的是A.酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高B.先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵C.与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好D.适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖【答案】D【解析】醋酸菌是嗜热菌，果醋发酵所需的最适温度较高，A错误；进行果酒、果醋发酵实验，要先进行隔绝空气果酒发酵，再供氧进行果醋发酵，B错误；人工接种菌种单一，自然发酵菌群丰富，风味及品质更好，C错误；适当加大接种量，让菌体快速形成优势菌群，可以抑制杂菌生长，提高发酵速率，D正确。【试题评价】此题考查果酒、果醋发酵实验，内容基础，难度不大。（江苏生物卷）17将图中果酒发酵
26、装置改装后用于探究酵母菌呼吸方式的实验，下列相关操作错误的是A.探究有氧条件下酵母菌呼吸方式时打开阀aB.经管口3取样检测酒精和CO2的产生情况C.实验开始前对改装后整个装置进行气密性检查D.改装时将盛有澄清石灰水的试剂瓶与管口2连通【答案】B【解析】图中管口1为进气口，管口2为排气孔，管口3可以检查液体中的成分，因此探究有氧条件下酵母菌的呼吸，应打开阀门a通入氧气，A正确；管口3可以检测酒精，管口2可以与澄清石灰水相连以检查CO2，因此B错误。（江苏生物卷）18某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是A.培养基分装到培养皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划
27、线C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D.培养过程中每隔一周观察一次【答案】B【解析】在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板，A错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B正确；接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；培养过程中一般要隔天观察一次，D错误。（全国课标卷）39【生物选修1 生物技术实践】（15分）回答下列有关泡菜制作的习题：（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是 。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐
28、含量的因素有 、 和 等。（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ，原因是： 。【答案】（1）消灭杂菌 增加乳酸菌含量 （2）无氧呼吸 细胞质 （3）温度、食盐用量、腌制时间 （4）乳酸菌数量增加，杂菌数量较少 乳酸菌比杂菌更为耐酸 【解析】（1）盐水中可能含有杂菌，制作泡菜时，所用盐水需要煮沸，以便杀死盐水中的杂菌。陈泡菜中含有现成的乳酸菌，加入后，可以缩短制作时间。 （2）乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行无氧呼吸的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质基质中。 （3）都泡菜的制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素有温度过高、食盐用量不
29、足、腌制时间等。 （4）从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐发酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加，其他杂菌较少；原因是酸性条件下，不利于杂菌生存，增加乳酸菌的数量。 【试题点评】本题通过考查泡菜制作的相关基础知识，主要考查识记能力和对相关知识的判断能力。 （全国课标卷）39.生物选修1：生物技术实践临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用_ _法或_ _法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。（2）取该单菌落
30、适当稀释，用_ _法接种于固体培养基表面，在37培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_ _；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明_ _；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的_ _。（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_。【答案】：（1）划线 稀释涂布（或涂
31、布） （2）涂布 （3）敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性比对A弱 耐药菌 （4）A【解析】：本题考查微生物的培养和应用。（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法。（2）取该单菌落适当稀释，用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养。（3）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对该抗生素有敏感性，周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。（4）实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。（山东卷）34.(8分) 【生物-生物技术实践】胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得，流程如下：（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用 或
32、平板划线法接种。采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环其目的是 。（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供 和 。（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和 以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用 方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤。其目的是 。（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为 。【答案】（1）稀释涂布平板法 灭菌（防止杂菌污染） （2）碳源 氮源 （3）时间 水浴 滤去不溶物（4）(实验)对照【解析】（1）接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和夹板划线法，接种过程为了避免其它杂菌的污染，要做无菌操作，所
33、以接种前需对接种环灭菌操作。（2）蔗糖主要提供碳源，当然也可以作为能源物质，硝酸盐含氮元素，可提供氮源。（3）温度过高、干燥时间过长会导致胡萝卜素分解；由于萃取剂往往有挥发性，直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸；萃取后需将原料中不溶于萃取剂的成分滤去。（4）提取出来的胡萝卜素往往不是纯的，用标准样品主要起一个对照的作用。【试题评价】本题主要考查微生物培养、植物中有效成分提取等有关知识，意在考查考生识记和理解应用能力。（四川卷）10（12分）由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。重组质粒-淀粉酶基
34、因工程酵母菌固体平板培养液体培养菌种接种到新鲜培养基接种接种选择、接种图甲 图乙 (1)图甲中，过程需要的酶有_。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以_作为唯一碳源。、过程需要重复几次，目的是_。(2）某间学尝试过程的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_；推测该同学接种时可能的操作失误是_。(3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种_菌的发酵罐需要先排气，其原因是_。（4）用凝胶色谱法分离-淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较_。【答案】（1）限制性核酸内切酶、DNA连接酶 淀粉 进一步筛选纯化获得分解淀粉
35、能力强的酵母菌 （2）稀释涂布平板法 涂布不均匀 （3）工程酵母 工程菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生CO2的速率更快 （4）小【解析】本题考查选修本中相关知识，包括有基因工程、微生物的培养和发酵、蛋白质的提取和分离等。（1）步骤为将目的基因与运载体连接，需要先用同一种限制性核酸内切酶分别切割质粒和目的基因，露出相同的黏性末端，然后再用DNA连接酶连接为重组质粒；而在以淀粉为唯一碳源的培养基中，其他微生物难以利用淀粉而被抑制，从而筛选高效利用淀粉的工程酵母菌；重复筛选多次可以提高目的菌的纯度。（2）图中平板培养后的结果，形成了多个菌落，因此为稀释涂布平板法，但是菌落分布不均匀，集
36、中分布在一定区域，说明涂布不均匀。（3）由于工程酵母菌能够更高效的利用淀粉，因此在以淀粉为原料的培养条件下，可以更快的进行增殖和发酵，酒精发酵产生的二氧化碳较多，所以需要先排气。（4）凝胶色谱法分离的原理是相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。因此，移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较小。【试题点评】本题以图像信息为载体，考查基因表达载体构建所需的酶、选择性培养基、微生物接种方法、细胞代谢以及蛋白质分离，意在考查学生基本操作能力，难度不大。针对此类题
37、型，复习时需要对重点的基本操作进行复习，或者让学生进行实际操作。（海南生物卷）30. 【生物选修1：生物技术实践】（15分）根据相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题： (l)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和_ _，以提高萃取效率：水蒸气蒸馏法_ _（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是_ _ _；鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用_ _法，并以_ _样品作为对照。 (2)若要提高衣物上血渍的去除效果，可在洗衣粉中加入_ _酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的_ _或_ _；若要提高衣物上油渍的去除效果，洗衣粉中可添加_ _酶；使用加酶洗衣粉时，
38、水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是_ _。【答案】(1)干燥（1分） 不适合（1分） 水蒸气蒸馏法适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出（3分）纸层析（2分） 标准的胡萝卜素（2分） (2)碱性蛋白（或蛋白）（1分） 氨基酸（1分）小分子肽（1分） 脂肪（1分）水温过低时酶活性较低，水温过高会使酶变性失活（2分）【解析】（1）萃取是将粉碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂中。水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。胡萝卜素粗品通过纸层析进
39、行鉴定，如果萃取样品中出现了和标准样品一样的层析带，说明提取胡萝卜素的实验成功。（2）血渍中含有蛋白质，可用含蛋白酶的洗衣粉洗涤。其原理是蛋白酶能将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸。油渍的主要成分是脂肪，需用含脂肪酶的洗衣粉。水温过低抑制酶的活性，水温过高会使酶变性失活。【试题点评】本题考查生物技术实践中的相关内容，包括胡萝卜素的提取和鉴定，以及加酶洗衣粉的应用。考查内容比较基础，难度较小，掌握教材上的基础知识是解答本题的关键。18.现代生物科技（重庆卷）2题 2 图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应 T 淋巴细胞B中使用胰蛋白酶有利于杂交
40、瘤细胞的形成C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群【答案】D【解析】是获得已经免疫的 B 细胞，A 项错误；胰蛋白酶使得组织块分散为单个细胞，B 项错误；同时具有 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性，C 项错误；经筛选后获得能够获得分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D 项正确。【试题评价】本题考查单克隆抗体制备流程相关只是和考生的识图能力，属理解层次，较易得分。（广东卷）3.从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是A.合成编码目的肽的DNA片段B.构建含目的肽DN
41、A片段的表达载体C.依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽D.筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽【答案】C【解析】由题可知，要设计出抗菌性强但溶血性弱的多肽P1，即在P1的基础之上设计出自然界原本不存在的蛋白质，可用蛋白质工程技术来实现。蛋白质工程的第一步是根据蛋白质的功能来设计预期的蛋白质结构，即题干中“依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽”，答案为C。【试题点评】本题以多肽药物的研发为情境，考查蛋白质工程技术的基本过程，旨在考查应用能力。难度较小。（浙江卷）6实验小鼠皮肤细胞培养（非克隆培养）的基本过程如图所示。下列叙述错误的是A甲过程需要对实验小鼠进行消毒B乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化C丙过
42、程得到的细胞大多具有异倍体核型D丁过程得到的细胞具有异质性【答案】C【解析】动物细胞培养需要无毒无菌的环境，甲过程指从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒处理，A项正确；乙过程表示将得到的皮肤组织分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，B项正确；丙过程表示原代培养，此时的细胞仍能保持正常的二倍体核型，C项错误；丁过程表示传代培养，此时得到的细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展，D项正确。【试题评价】本题以小鼠皮肤细胞培养为载体，综合考查了动物细胞培养相关操作过程和考生的识记理解能力，涉及组织块的处理、原代培养和传代培养等相关内容，整体难度不大。（