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1、连翘籽综合利用的分析连翘 Forsythiasuspense(Thunb.)Vahl.为木犀科连翘属植物。连翘以野生为主 , 受抢青和气候因素的影响, 药材质量无法保证 , 栽培是解决连翘药材质量的最佳方法 , 高质量的种子是连翘规范化栽培的前提。目前 , 大量连翘成熟种子被弃出, 造成了资源浪费。本文考察了连翘种子的质量检验方法 , 并制定出连翘种子质量分级标准。通过 HPLC分别进行连翘种子 ( 即为连翘籽 ) 和果壳中有效成分的含量测定,采用 GC-MS分析连翘种子脂肪油各成分的相对含量, 并对连翘种子、果壳以及连翘籽油的抗炎、抗病毒、抗氧化的活性进行了研究, 为连翘籽的综合利用提供依据
2、。研究结果如下 :1. 连翘种子质量检验方法的研究表明, 检验前连翘种子应过14 目筛 , 去除杂质和瘪粒。扦样量应不少于 12.2 g, 净度分析是将净种子与杂质分开并称重计算净度,千粒重可采用百粒法测定, 高恒温粉碎 (130 2) 烘干 5 h 法测定水分含量 ,0.2%TTC溶液 (35 1) 避光染色 5 h 测定生命活力 , 连翘种子萌发不需要层积 , 发芽率测定时可直接用 25恒温光照双层滤纸床进行。 2. 依据 K- 聚类结果 ,并结合生产实践 , 选取净度、含水量、千粒重、胚率及发芽率等5 项指标作为分级标准。连翘种子可以分为三级 : 一等连翘种子净度 90%,胚率 90%,
3、含水量 10%,千粒重 3.9 g, 发芽率 85%;二等连翘种子净度 80%,胚率 83%89%,含水量10%,千粒重 3.2 g3.8 g,发芽率 74%84%;三等连翘种子净度 70%,胚率 72%,含水量 10%,千粒重 3.1 g, 发芽率 54%。3. 采用 HPLC分别对 13 批不同产地的连翘籽、果壳中的连翘酯苷A 和 3 种木脂素类成分 ( 松脂醇 - -D- 葡萄糖苷、连翘苷、连翘酯素 ) 进行含量测定 , 结果表明连翘果壳中的连翘苷含量大多未达到药典标准 , 且连翘籽中 3 种木脂素的含量均低于果壳。但连翘籽中连翘酯苷A 的含量明显高于果壳 , 加入连翘籽可明显提高老翘中
4、连翘酯苷 A 含量。 4. 测定连翘籽油的理化性质, 发现其相对密度为0.95 g/cm3,酸值为 1.08 mgKOH/g,过氧化值为 0.12%, 皂化值是 121.74 KOH/g,碘值是 160.20g/100g 。连翘籽油通过 GC-MS测定分析 , 其主要成分为亚油酸 (60.583%), 油酸(24.160%), 乙酸松油 (5.600%), 硬脂酸 (1.867%), - 萜品烯 (0.606%),D- 柠檬酸(1.244%) 以及松油烯 -4- 醇(1.430%) 等, 脂肪酸为连翘籽油的主要成分。 5. 本研究以小鼠 RAW264.7细胞为模型细胞 ,LPS 诱导活化并建立体外炎症模型,MTT法检测细胞毒性 , 连翘籽、果壳提取物及连翘籽油在浓度为1.616.6 g/mL 范围内对小鼠 RAW264.7细胞无毒副作用 ;ELISA 法检测 IL-1 、 TNF-炎症因子水平 , 连翘籽、果壳提取物及连翘籽油在浓度 15g/mL 范围内有抗炎效果并呈剂量依赖性 ,且连翘籽抗炎效果较显著; 神经氨酸酶抑制剂筛选试剂盒检测连翘籽、果壳以及连翘籽油的抗流感病毒活性, 得出连翘籽、果壳提取物的NA抑制效果较好 ;DPPH法和超氧阴离子自由基清除实验结果表明, 三者均有抗氧化活性 , 为综合分析和利用连翘籽资源提供理论依据。